| 研究概要 |
前年度に開発したナノスプレーを直接加工したマイクロチップ電気泳動(MCE)分析用シクロオレフィンポリマー製チップを用いて,金ナノ微粒子に基づくレーザースプレーイオン化(LSI)質量分析(MS)検出について検討した。試料として,カフェインまたはイブプロフェンを溶解したグリシンークエン酸塩緩衝液に金ナノ微粒子を100pMになるように分散したものを用い,インフユージョンモードでMS検出器へ導入した。ナノスプレーがMSオリフィスに対して,90°となるように配置し,ナノスプレー先端にレーザー(532nm)を照射した際のカフェインの信号強度について検討したところ,ピコ秒パルスレーザー(1～10μW)を照射した際には,ベースラインが不安定となった。また,レーザーを照射し続けたところ,金ナノ微粒子の凝集体がスプレー先端に生成し,流路を閉塞したため,パルスレーザーは有効ではなかった。一方,CWレーザー(1～10mW)を照射したところ,カフェイン(正イオンモード)の検出感度に有意な差はなかったのに対し,イブプロフェン(負イオンモード)では信号強度が12倍に増加した。したがって,金ナノ微粒子を用いるLSIにおいては,負イオンモードで感度増幅効果があることが示唆された。
MCE-LSI-MSのさらなる高感度化を目指し,タンパク質をマイクロヒーター上で濃縮してから,LSI-MS検出するためのチップデバイスの試作を行った。ポリジメチルシロキサン基板にチャネルを形成し,幅1mmの銀薄膜を埋め込んでヒーターとした。タンパク質の変性剤を含む泳動液を満たしたチャネルにBSAを注入したところ,ヒーター上でBSAは濃縮され,検出感度が5倍以上に向上した。ナノスプレーを接合したチップとの組み合わせにより,高感度なMCE-LSI-MSが期待できる。
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