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2009 年度 研究成果報告書

硝酸シグナル伝達ネットワーク解明のための新たな解析法の開発

研究課題

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研究課題/領域番号 20770024
研究種目

若手研究(B)

配分区分補助金
研究分野 植物分子生物・生理学
研究機関北海道大学

研究代表者

GOTO Derek  北海道大学, 創成研究機構, 特任助教 (40419205)

研究期間 (年度) 2008 – 2009
キーワード植物 / 根 / 栄養応答 / 栄養輸送
研究概要

本研究の目的は、植物根の硝酸塩レベルによって変化を起こす、新らたな硝酸塩濃度蛍光指示薬を開発するものである。例えば、蛍光タンパク質の発光比率が変化することにより、硝酸レベルは変化する。このように、この指示薬は、二つの蛍光タンパク質間に起こる蛍光共鳴エネルギー転移(FRET)に大きく依存している。Synechcoccus PCC79 24 cyanobacteriumシアノバクテリアは、高親和性硝酸結合タンパク質NrtAを含み、その遺伝子によりコード化されたタンパク質は新指示薬として使用された。NrtAが適切なベクターでクローン化された後、そのクローン化された遺伝子は、CFPとYFPをコード化する遺伝子と融合された。この新たに作られた融合タンパク質で、FRET活動での発現に成功し、CFPが励起した時のみにCFPとYFPの両蛍光タンパク質の発光が見られた。わずかであるが、タンパク質が高濃度硝酸に露光された際、FRET比率でも上昇が見られた。高濃度硝酸比率は低硝酸レベルにおいても発現されるが、その比率は植物に使用するには不十分である。NrtA内の保存残基は同定され、部位特異的変異誘発に使用するために改良された。大きな硝酸反応の結果は得られなかったが、これにより硝酸高初期FRET比率を抑える事に成功した。植物根研究に用いるために、この指示薬の実用化に向けた最適化が今後期待される。

  • 研究成果

    (4件)

すべて 2009 その他

すべて 学会発表 (3件) 備考 (1件)

  • [学会発表] Initiation of specialised nutrient transfer within plant roots by a sedentary parasite2009

    • 著者名/発表者名
      Goto, D.
    • 学会等名
      International Symposium on Plant Membrane Transport
    • 発表場所
      東京大学、東京、日本
    • 年月日
      20090312-20090313
  • [学会発表] トマトとイモムシの隠れた戦い2009

    • 著者名/発表者名
      Goto, D.
    • 学会等名
      第5回北大-九大合同活動報告会
    • 発表場所
      東京、日本
    • 年月日
      2009-12-10
  • [学会発表] Disruption of plant root function by a parasite: How do root-knot nematodes establish permanent infection sites inside plant roots?2009

    • 著者名/発表者名
      Goto, D.
    • 学会等名
      Invited Seminar, Australian Centre for Plant Functional Genomics, University of Adelaide
    • 発表場所
      Adelaide, AUSTRALIA
    • 年月日
      2009-02-22
  • [備考]

    • URL

      http://gotolab.cris.hokudai.ac.jp

URL: 

公開日: 2011-06-18   更新日: 2021-04-07  

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