| 研究概要 |
DNA修復機構は,恒常的に生じるDNA損傷を修復し,ゲノムの安定性を維持している.しかしDNA複製中に生じた損傷に対する積極的な修復機構は知られていない.複製中に生じた損傷は複製型DNAポリメラーゼによるDNA複製を阻害するため,細胞は危機的な状況になる.損傷による複製停止を回避するための一つの戦略が損傷乗り越えDNA合成(TLS)である.TLSは,誤りがちなDNAポリメラーゼ(TLSポリメラーゼ)による損傷塩基を鋳型としたDNA合成であり,複製型ポリメラーゼに代わって,TLSポリメラーゼが一時的にDNA合成を行う.その後,再び複製型ポリメラーゼがDNA合成を再開し,DNA複製が完了する.
本研究対象であるREV7は真核生物で保存されたタンパク質で,TLSポリメラーゼであるREV1およびREV3と相互作用することが報告されている.また,遺伝学的な研究によって,REV1, REV3, REV7がTLSにおいて協同的に機能することが報告されているが,REV7の詳細な細胞機能や,3つのREVタンパク質がどのように損傷部位で協同的に機能するかは明らかになっていなかった.
本研究では,REV7の細胞機能,REVタンパク質によるTLSの作用機序を構造生物学的に明らかにするために,REV7とREV3フラグメント(1847-1898)との複合体のX線結晶構造解析を行った.さらに,複合体の立体構造に基づいたREVタンパク質の相互作用解析,動物細胞を用いたREV7の機能解析を行った.その結果,REV1, REV3, REV7は三者複合体を形成し,REV7が2つのTLSポリメラーゼ(REV1とREV3)を構造機能的に繋ぐアダプター分子として機能することを明らかにした.
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