| 研究概要 |
平成20年度は、Src型チロシンキナーゼLynの膜移行シグナルと蛍光タンパク質Venusの融合タンバク質遺伝子をRosa26遺伝子座に組み込んだ遺伝子改変マウス胚を顕微鏡下で培養、撮影するための条件検討を行った。この遺伝子改変マウス胚を用いる事により、細胞膜を可視化することができるため、胚発生過程での細胞の挙動を観察する事が可能となる。現在、画像を解析するために最適と思われる条を決定し、発生過程の細胞の挙動と細胞分化の関連性を明らかにするためにデータの収と解析を行っている。
同時に、発生過程におけるOct4、Nanog(内部細胞塊のマーカー分子)、Cdx2(栄養外胚葉のマーカー分子)、それぞれの発現変化について経時的なサンプリングを行い、抗体染色、観察を行った。その結果、Oct4は胚盤胞後期までは全ての細胞に発現し、Cdx2は胚の外側に接している細胞において、発現する細胞数、強度ともに増加していく事は明らかになった。通常、ES細胞ではOct4とCdx2は互いに発現を抑制する事が報告されているが、着床前胚では胚盤胞形成までの間、胚の外側の細胞において2つの因子が同時に発現していることがわかった。この結果から、着床前胚ではES細胞とは異なる発現制御機構が存在する事が考えられる。この結果は、平成20年度に発表した論文(Fujimori, et.al., 2008)の中で報告した。Nanogに関しては、最終的にはOct4と同様に胚盤胞後期では内部細胞塊に発現が限局するが、その過程における発現細胞数、発現パターン、発現強度は個体により大きく異なる事が明らかになった。着床前胚発生過程におけるNanogの発現パターンが細胞分化に及ぼす影響と、その発現制御メカニズムについては引き続き詳細に解析している。
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