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tRNaseZは真核生物、古細菌、一部の真正細菌においてtRNAの3'プロセシングに関与するエンド型リボヌクレアーゼで、前駆体tRNAの3'トレーラー配列をdiscriminator塩基で切断する酵素である。tRNaseZが生育に必須であるという理由もあり、特に真核生物におけるin vivo解析はあまり行われず、tRNaseZの生理学的意義、機能を正確に把握できていないのが現状である。そこで生育必須遺伝子でも解析可能なツールが揃っている酵母Saccharomyces cerevisiaeを題材に解析を行った。まず、大腸菌で組換え酵母RNaseZを生産・精製し、in vitroにおける酵母前駆体tRNAの3'プロセシング実験を行った。酵母tRNAには、イントロンを含むものと含まないものが存在するが、その存在が、前駆体tRNAの3'プロセシングに与える影響について調べたところ、tRNaseZの前駆体tRNA切断効率にほとんど影響を与えなかった。すなわち、酵母tRNaseZは、イントロン以外の部分を認識して、前駆体tRNAを切断していると考えられた。また、前駆体tRNAの5'リーダー配列の影響についても解析を行った結果、5'リーダーが存在すると3'トレーラーとの間で水素結合を介して、新たにステムを形成し、2次構造が異なることから切断効率が大きく減少した。これは、酵母tRNaseZは、アクセプターステム付近を認識して、切断している可能性を示唆する結果である。また、酵母tRNaseZの前駆体tRNAの切断部位について調べたところ、5'リーダー配列、イントロンの有無、切断効率、tRNAの種類に関係なく、前駆体tRNAはすべてdiscriminator塩基で切断されていた。酵母tRNaseZは、エンド型リボヌクレアーゼであり、非常に特異性の高い酵素であることが分かった。
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