2011 年度研究成果報告書

不斉反応を触媒する酵素群の分子育種:非天然アミノ酸ケミカルライブラリーの構築

研究課題

研究課題/領域番号	20780076
研究種目	若手研究(B)
配分区分	補助金
研究分野	応用生物化学
研究機関	高知大学
研究代表者	村松久司高知大学, 教育研究部・総合科学系, 准教授 (90437343)
研究期間 (年度)	2008 – 2011
キーワード	不斉合成 / タンパク質の耐熱化 / 非タンパク質性アミノ酸 / N-メチル-L-アミノ酸脱水素酵素 / Pseudomonas putida
研究概要	Pseudomonas putida由来のdpkA遺伝子にエラープローンPCRでランダム変異を導入し、耐熱性が向上した変異型酵素V117M、Q302Rを取得した。野生型酵素と耐熱化酵素V117M、Q302R、V117M/ Q302Rを精製して機能解析した。耐熱化酵素は野生型酵素よりも温度やpHの変化に対して高い安定性を示したが、基質特異性に変化はなく、様々なN-メチル-L-アミノ酸の生産に利用できると考えられた。

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