| 研究概要 |
UDP-アラビノースムターゼ(UAM)は植物細胞壁糖鎖アラビナンの生合成に深く関わっている。またUAMは植物細胞壁糖鎖合成のイニシエーターと推察されているタンパク質でもある。それゆえ、UAMの植物細胞壁糖鎖生合成における役割を調べるために、イネUAM遺伝子をタバコに導入し過剰発現させた形質転換体を作成した。形質転換体作成では、ウイルスベクターを用いたタバコ(葉)でのセンスRNA導入(一過性発現)を行った。イネUAM遺伝子はUAM1, 2, 3の三つの相同遺伝子が存在し、植物内ではこれら3種が複合体を形成していると考えられている。それゆえ、UAM1遺伝子のみ, UAM2遺伝子のみ, UAM3遺伝子のみ、そしてUAM1〜3遺伝子を同時に導入した形質転換体をそれぞれ作成した。イネUAM1〜3遺伝子それぞれについて発現ベクターを構築し、プラスミドをウィルスへ導入した。そのウイルスをタバコへ感染させ、形質転換体の作成を行った。形質転換体のUAM酵素活性を調べた結果、形質転換体全てにおいて野生型に比べUAM活性が増加しており、一番高いもので野生型の3倍のUAM活性の増加が見られた。しかし、UAM2はこれまでの研究より酵素活性を保持しないことが知られている。現在はUAM2を導入した形質転換体でUAM酵素活性が増加した原因について検討しているが、形質転換体作成の際のウイルス感染により、タバコ内在性のUAMが過剰に発現したことも考えられ、UAM遺伝子過剰発現形質転換体を作成するのに本実験で用いた方法は適さない可能性が考えられる。
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