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水棲動物であるイルカにおける造血器官の存在場所は明確にされておらず、造血器官の形成および造血機序も不明である。本研究は、イルカ血液細胞の供給源である造血幹細胞の定着器官、幹細胞の移動に関わる走化性因子およびその受容体を同定することによって、哺乳動物において特異なイルカの造血の成立機序を明らかにし、その系統発生学的な意義を解明すると同時に、未だ不明な点の多い造血幹細胞の造血微小環境への定着機構および造血に必須な因子・条件を見出すことを目的とする。
当該年度は、バンドウイルカの血球をラットに免疫してイルカ血液細胞表面抗原に対するモノクローナル抗体の作出を試みた。イルカの顆粒球に対する数種のモノクローナル抗体を作製し、その中からバンドウイルカ好中球に対して特異的に反応する抗体をスクリーニングした。得られた特異抗体のうち、DN1抗体は、バンドウイルカ好中球のみを認識し、他の顆粒球である好酸球、また単核球であるリンパ球および単球を認識しなかった。DN1抗体は、ヒトおよびウシ白血球のいずれにも反応しなかった。DN1抗体を用いた免疫磁気ビーズ細胞分離法によって、バンドウイルカの顆粒球分画から好中球および好酸球を高純度に分離する方法を見いだした。これまでイルカ白血球の高純度分離法は確立されていなかったため、本法の応用によって、水棲哺乳動物の血液細胞および特定細胞群の分離・同定が容易となり、それぞれの細胞機能をより詳細に探索することが可能となった。
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