| 研究概要 |
これまでに研究代表者らは、黄体局所に発現するゴナドトロピン放出ホルモン(GnRH)と、それによって発現の増加するアネキシン5(AX5)が、黄体の退行に密接に関与すること、これらの遺伝子発現の上昇は、次世代の卵胞発育時期と一致してみられることを示してきた。
本年度は、前年度の実験に継続して取り組みむとともに、GnRH-AX5系の作用点について調べることで、卵胞発育シグナルとしての黄体局所のGnRHによる黄体退行の制御機構を解明することとした。
実験1)生殖系組織におけるGnRH、AX5の発現動態
成熟雌ラットの性周期の各段階の黄体において、GnRH、AX5について二重免疫組織化学染色を行ない、同じ黄体細胞が発現していることを明らかにした。また乳腺にも同様にGnRHとAX5を発現する細胞が存在することを発見した。
実験2)エストロジェンの作用による黄体退行の制御
エストロジェンの拮抗阻害薬を投与したところ、GnRH、AX5の発現低下とアポトーシスの減少がみられた。その過程に、いくつかの脂質メディエータが関与している可能性が示された。骨成長への影響もserendipitousに発見した。
実験3)黄体細胞の不可逆的な機能変化に関連する細胞内物質の探索
黄体細胞の器官培養系を用いることによって、GnRHによってBcl-2,Bax,Caspase3の活性が変動し、アポトーシスが実行されることを明らかにした。
実験4)GnRH-AX5系を抑制するPRLの作用点の解明
黄体の器官培養にGnRHもしくはその拮抗阻害薬を添加し、アポトーシス実行因子であるCaspase3の活性を調べたところ、GnRHの前処理によってPRLによるCaspase3の減少が抑制された。
|
