| 研究概要 |
I型インターフェロン(IFN)は細胞死関連タンパク質DAXXのはたらきを介してリンパ球の増殖抑制・細胞死を誘導し、B細胞レパトアを調節すると考えられているが、分子機構の詳細が不明であるため本研究で解明することを目的とした。今年度はDAXX遺伝子発現を司るキナーゼとして報告されているTYK2チロシンキナーゼの機能制御に着目し解析を進めた。酵母two-hybrid法によって単離されたTYK2新規結合タンパクのひとつJun activation domain-binding protein 1(JAB1)は現在までIFNシグナルへの関与は知られていない。本研究においてsiRNAによるJAB1発現抑制に伴いIFNシグナル伝達分子TYK2,STAT1・3の活性化やその標的遺伝子発現が抑制された。またJAB1発現抑制によって、IFN受容体を構成するIFNAR1サブユニットの細胞内総量が減少した。siRNAによるTYK2発現抑制によりIFNAR1タンパク量が減少するという既知の結果も再現されJAB1減少による効果と一致した。JAB1はイソペプチダーゼ酵素活性をもつが、活性を担う領域に存在する151番目のアスパラギン酸に点変異を導入し活性を失わせた分子を過剰発現させても野生型と同様にIFNAR1安定化能を示した。以上よりTYK2新規結合タンパク質JAB1はその酵素活性とは独立にIFNAR1安定化に関与し、IFNシグナル伝達に寄与することが新たに示唆された。
またIFNによるDAXX発現誘導経路について、マウス由来細胞株と各種経路阻害薬を用いた解析からJNK経路の部分的関与を示す結果が得られた。一方、マウスの系と異なりヒト由来細胞株を用いた解析ではIFNによるDAXX誘導が観察されなかった。よってDAXXの、特に遺伝子発現についてはマウスとヒトとでIFNの寄与が異なることが判明した。
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