| 研究概要 |
Myeloidelf-1 like factor(MEF)は663アミノ酸からなるETS転写因子で, 分化・免疫・癌制御の分野において重要な役割を果たしている. そこで, 本研究では, MEFそれ自身の遺伝子発現制御機構のさらなる解明を究極の目的とし, 近年その多様な標的遺伝子の転写調節により様々な生理機能の制御を行っていることが明らかになってきた転写因子p53によるMEF発現制御機構ならびに自然免疫系の制御機構の解明を種々の方法にて検討した. まず, p53によるMEF転写抑制機構の解明を行った. 転写因子Sp1およびE2F1に着目し, 種々の検討を実施したところ, Sp1結合サイトを含むプロモーター領域ではp53による活性抑制が見られなかったことから, Sp1の関与は極めて低いことが示された. 一方, p53によるMEFプロモーター活性抑制が見られた領域には2つのE2F1結合サイトが存在したことから, これら2つのサイトに変異を導入したプロモーターコンストラクトを作製し, Luciferase assayによるプロモーター活性測定を行った. その結果, 転写開始点から-344bpのE2F1結合領域がp53によるMEF転写抑制に重要であることが明らかになった. 最後に, 内因性MEFタンパク質安定性へのp53の寄与を検討した. その結果, p53は, MEFタンパク質安定性に対して影響を与えなかったことから, p53によるMEF発現抑制は, mRNAレベルの転写抑制であることが示唆された.
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