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本年度は主に、サルモネラ菌に特徴的なペプチドグリカン修飾を同定する足がかりとして、Salmonella typhimuriumにおけるN-脱アセチル化酵素候補遺伝子のクローニングと、その遺伝子産物の解析を行った。
リステリアのペプチドグリカンN-脱アセチル化酵素(PgdA)との相同性を指標にデータベース検索を行った結果、サルモネラ菌のペプチドグリカンN-脱アセチル化酵素の候補遺伝子が二種類見つかり、これら遺伝子のクローニングをいった。二種類の遺伝子産物について細胞内局在を予測したところ、一つは細胞質、一つはペリプラズムもしくは外膜に存在するタンパク質であると予想された。後者については、その局在からペプチドグリカンの修飾に関わる可能性が高いと考えられる。
Staphylococcus aureusなどにおいて、リゾチーム耐性とペプチドグリカン修飾は密接に関連していることが知られている。候補遺伝子を大腸菌DH5αで過剰発現させ、栄養培地での生育に対するリゾチーム添加の影響を調べたところ、本遺伝子産物がリゾチーム感受性に関与することが示唆された。
今後は、合成基質を用いて候補遺伝子産物の酵素活性を測定し、本酵素がペプチドグリカンのN-脱アセチル化酵素であることの確認を行う。また、候補遺伝子の欠損株を作製し、サルモネラにおけるペプチドグリカン修飾とリゾチーム感受性との関係を明らかにしていく予定である。
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