| 研究概要 |
MT遺伝子を発現するマウス胎仔由来細胞P^+から高濃度のCdに耐性を示す耐性細胞(A^+70、B^+70)を樹立し、様々な金属に対する細胞毒性と金属輸送について解析した。A^+70、B^+70におけるCdのLD50は約200μMでありP^+の約7倍の耐性を示した。MTの発現はA^+70、B^+70において。mRNAレベル及び蛋白レベル共に著しく上昇した。しかし、A^+70、B^+70の細胞内Cd蓄積量(24時間後)、および、Cd取り込み速度(1時間後)はP^+に比べて減少していた。A^+70、B^+70ではZn輸送体ZIP8、2価鉄輸送体DMT1および電位依存型CaチャネルのうちL-type(Cacnα_<1C>),T-type(Cacnα_<1G>)のチャネルのサブユニットの発現が低下していた。Cdの排泄は、培地をCd-freeにして1日後にはA^+70、B^+70で若干亢進したが、7日後にはほとんど差がなくなった。Znを細胞外へ排泄する輸送体であるZnT1は培地にCdが存在するとmRNAレベルで著しい上昇を示したが、膜画分の蛋白レベルはほとんど変化を示さなかった。一方で、Ca channelのうち、L-type(Cacnα_<1C>),T-type(Cacnα_<1G>)のチャネルのサブユニットの発現が低下していた。これまでの報告で、ZnT-1とCaチャネルがクロストークしており、ZnT-1の発現上昇でCa流入が低下することが報告されているが、本細胞においてはこのようなクロストークがあるかどうかは今後さらに検討が必要である。ZnT1の高発現がCd排泄のわずかな増加と連動していたが、因果関係についてはさらに検討が必要である。以上のことから、MT遺伝子が発現しているCd耐性細胞においても、MTの発現亢進のみならず、Cdの取り込みの抑制、排泄の亢進もCd耐性獲得に関与すると考えられる。
今後、Cd輸送機構についてさらに検討していく必要がある。
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