腫瘍血管特異的な細胞内侵入抗体の創製とその新規抗腫瘍血管療法への展開

2009 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20790134
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 医療系薬学
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 向 洋平 大阪大学, 大学院・薬学研究科, 助教 (60444501)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2009
• キーワード: 医療薬剤学

研究概要

腫瘍血管特異的マーカー(VEGFR2,Robo4他)に対する細胞内侵入抗体を独自のファージ表面提示法を改良した方法により単離した。得られた候補クローンのイムノコンジュゲート製剤としての有用性を、腫瘍モデルマウス対する治療検討により評価したところ、細胞内侵入活性を有する抗体のみが、治療効果を発揮するという非常に興味深い知見を得た。この結果は細胞内侵入抗体を単離することが抗体医薬開発に貢献する可能性を示している。

研究成果

• [雑誌論文] Simple PEG Conjugation of SPIO via an Au-S Bond Improves Its Tumor Targeting Potency as a Novel MR Tumor Imaging Agent (2010)
  • 著者名/発表者名: Kojima H, Mukai Y, Yoshikawa M, Kamei K, Yoshikawa T, Morita M, Inubushi T, Yamamoto TA, Yoshioka Y, Okada N, Seino S, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Bioconjug Chem. (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Therapeutic effect of PEGylated TNFR1-selective antagonistic mutant TNF in experimental autoimmune encephalomyelitis mice. (2010)
  • 著者名/発表者名: Nomura T, Abe Y, Kamada H, Shibata H, Kayamuro H, Inoue M, Kawara T, Arita S, Furuya T, Yamashita T, Nagano K, Yoshikawa T, Yoshioka Y, Mukai Y, Nakagawa S, Taniai M, Ohta T, Serada S, Naka T, Tsunoda SI, Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: J Control Release (in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Creation of a LIGHT mutant with the capacity to evade the decoy receptor for cancer therapy (2010)
  • 著者名/発表者名: Morishige T, Yoshioka Y, Inakura H, Tanabe A, Yao X, Tsunoda S, Tsutsumi Y, Mukai Y, Okada N, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Biomaterials 31(12) ページ: 3357-63
  • 査読あり
• [雑誌論文] Creation of a lysine-deficient LIGHT mutant with the capacity for site-specific PEGylation and low affinity for a decoy receptor (2010)
  • 著者名/発表者名: Morishige T, Yoshioka Y, Inakura H, Tanabe A, Yao X, Tsunoda S, Tsutsumi Y, Mukai Y, Okada N, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun 393(4) ページ: 888-93
  • 査読あり
• [雑誌論文] Tumor-targeting CTL expressing a single-chain Fv specific for VEGFR2 (2010)
  • 著者名/発表者名: Kanagawa N, Yanagawa T, Mukai Y, Yoshioka Y, Okada N, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 394(1) ページ: 54-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Creation of lysine-deficient mutant lymphotoxin-alpha with receptor selectivity by using a phage display system. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yoshioka Y, Watanabe H, Morishige T, Yao X, Ikemizu S, Nagao C, Ahmad S, Mizuguchi K, Tsunoda S, Tsutsumi Y, Mukai Y, Okada N, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Biomaterials 31(7) ページ: 1935-43
  • 査読あり
• [雑誌論文] Comparison of the anti-tumor activity of native, secreted, and membrane-bound LIGHT in mouse tumor models. (2010)
  • 著者名/発表者名: Morishige T, Yoshioka Y, Tanabe A, Yao X, Mizuguchi H, Tsunoda S, Tsutsumi Y, Mukai Y, Okada N, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Int Immunopharmacol 10(1) ページ: 26-33
  • 査読あり
• [雑誌論文] 腫瘍MRイメージングにおける造影剤開発 (2010)
  • 著者名/発表者名: 向洋平、中川晋作
  • 雑誌名: JSMI Report. 3(1) ページ: 14-17
  • 査読あり
• [雑誌論文] The treatment of established murine collagen-induced arthritis with a TNFR1-selective antagonistic mutant TNF (2009)
  • 著者名/発表者名: Shibata H, Yoshioka Y, Abe Y, Ohkawa A, Nomura T, Minowa K, Mukai Y, Nakagawa S, Taniai M, Ohta T, Kamada H, Tsunoda S, Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biomaterials 30(34) ページ: 6638-47
  • 査読あり
• [雑誌論文] LIGHT protein suppresses tumor growth by augmentation of immune response (2009)
  • 著者名/発表者名: Morishige T, Yoshioka Y, Inakura H, Tanabe A, Watanabe H, Yao X, Tsunoda S, Tsutsumi Y, Mukai Y, Okada N, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Immunol Lett. 127(1) ページ: 33-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Novel protein engineering strategy for creating highly receptor-selective mutant TNFs (2009)
  • 著者名/発表者名: Nomura T, Abe Y, Kamada H, Inoue M, Kawara T, Arita S, Furuya T, Yoshioka Y, Shibata H, Kayamuro H, Yamashita T, Nagano K, Yoshikawa T, Mukai Y, Nakagawa S, Taniai M, Ohta T, Tsunoda SI, Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biochem Biophys Res Commun. 388(4) ページ: 667-71
  • 査読あり
• [雑誌論文] Fast binding kinetics and conserved 3D structure underlie the antagonistic activity of mutant TNF: useful information for designing artificial proteo-antagonists (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y, Nakamura T, Yoshioka Y, Shibata H, Abe Y, Nomura T, Taniai M, Ohta T, Nakagawa S, Tsunoda S, Kamada H, Yamagata Y, Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: J Biochem. 146(2)(表紙掲載) ページ: 167-72
  • 査読あり
• [雑誌論文] The augmentation of intracellular delivery of peptide therapeutics by artificial protein transduction domains (2009)
  • 著者名/発表者名: Yoshikawa T, Sugita T, Mukai Y, Yamanada N, Nagano K, Nabeshi H, Shibata H, Yoshioka Y, Nakagawa S, Kamada H, Tsunoda S, Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Biomaterials 30(19) ページ: 3318-23
  • 査読あり
• [雑誌論文] Crystallization and preliminary X-ray analysis of the tumour necrosis factorα-tumour necrosis factor receptor type 2 complex (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y, Nakamura T, Yoshioka Y, Tsunoda S, Kamada H, Nakagawa S, Yamagata Y, Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: Acta Cryst F65(Pt3) ページ: 295-8
  • 査読あり
• [雑誌論文] Direct cell-entry of gold/iron-oxide magnetic nanoparticles in adenovirus mediated gene delivery (2009)
  • 著者名/発表者名: Kamei K, Mukai Y, Kojima H, Yoshikawa T, Yoshikawa M, Kiyohara G, Yamamoto TA, Yoshioka Y, Okada N, Seino S, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Biomaterials 30(9) ページ: 1809-14
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structure-function relationship of tumor necrosis factor (TNF) and its receptor interaction based on 3D structural analysis of a fully active TNFR1-selective TNF mutant (2009)
  • 著者名/発表者名: Mukai Y, Shibata H, Nakamura T, Yoshioka Y, Abe Y, Nomura T, Taniai M, Ohta T, Ikemizu S, Nakagawa S, Tsunoda S, Kamada H, Yamagata Y, Tsutsumi Y.
  • 雑誌名: J Mol Biol. 385(4) ページ: 1221-9
  • 査読あり
• [雑誌論文] Ligand-independent assembly of purified soluble magic roundabout (Robo4), a tumor-specific endothelial marker. (2008)
  • 著者名/発表者名: Yoshikawa M, Mukai Y, Okada Y, Yoshioka Y, Tsunoda SI, Tsutsumi Y, Okada N, Aird WC, Doi T, Nakagawa S.
  • 雑誌名: Protein Expr Purif 61(1) ページ: 78-82
  • 査読あり
• [学会発表] 抗体-薬物複合体;Antibody-drug conjugateの開発に適う細胞内侵入抗体の効率的探索法 (2010)
  • 著者名/発表者名: 吉川舞、向洋平、岡田欣晃、吉岡靖雄、岡田直貴、Aird WC、土井健史、堤康央、角田慎一、中川晋作
  • 学会等名: 日本薬学会第130年会
  • 発表場所: 岡山
  • 年月日: 2010-03-30
• [学会発表] Antibody Drug Conjugate製剤の開発を目指した細胞内侵入抗体の効率的探索法 (2010)
  • 著者名/発表者名: 向洋平
  • 学会等名: 技術情報協会セミナー「次世代抗体医薬品開発に向けた最新研究動向」
  • 発表場所: 東京
  • 年月日: 2010-01-25
• [学会発表] Ligand independent assembly of purified soluble Magic Roundabout (Robo4), a tumor-specific endothelial marker (2009)
  • 著者名/発表者名: Mai Yoshikawa, Yohei Mukai, Yoshiaki Okada, Yasuo Yoshioka, Shin-ichi Tsunoda, Yasuo Tsutsumi, Naoki Okada, William C Aird, Takefumi Doi, Shinsaku Nakagawa
  • 学会等名: ECCO 15 and 34th ESMO Multidisciplinary Congress
  • 発表場所: Berlin (Germany)
  • 年月日: 20090920-20090924
• [学会発表] Design of tumor targeting magnetic resonance imaging (MRI) agent based on gold/iron-oxide composite nanoparticle (2009)
  • 著者名/発表者名: Hiroki Kojima, Yohei Mukai, Kazumasa Kamei, Satoshi Seino, Masashi Morita, Toshiro Inubushi, Yasuo Yoshioka, Naoki Okada, Shinsaku Nakagawa
  • 学会等名: ECCO 15 and 34th ESMO Multidisciplinary Congress
  • 発表場所: Berlin (Germany)
  • 年月日: 20090920-20090924
• [学会発表] Direct cell entry of gold/iron-oxide magnetic nanoparticles in adenovirus mediated gene delivery (2009)
  • 著者名/発表者名: Yohei Mukai, Hiroki Kojima, Tomoaki Yoshikawa, Kazumasa Kamei, Mai Yoshikawa, Takao A Yamamoto, Yasuo Yoshioka, Naoki Okada, Satoshi Seino, Shinsaku Nakagawa
  • 学会等名: ECCO 15 and 34th ESMO Multidisciplinary Congress
  • 発表場所: Berlin (Germany)
  • 年月日: 20090920-20090924
• [学会発表] Receptor interaction of Tumor Necrosis Factor (TNF) based on 3D structural analysis of a fully active TNFR1-selective TNF mutant (2009)
  • 著者名/発表者名: Yohei Mukai, Teruya Nakamura, Yasuo Yoshioka, Yasuhiro Abe, Tetsuya Nomura, Madoka Taniai, Tsunetaka Ohta, Shinji Ikemizu, Shinsaku Nakagawa, Shin-ichi Tsunoda, Haruhiko Kamada, Yuriko Yamagata, Yasuo Tsutsumi
  • 学会等名: 12th International TNF Conference
  • 発表場所: Madrid (Spain)
  • 年月日: 20090426-20090429
• [学会発表] The development of fully active receptor selective Tumor Necrosis Factor (TNF) mutants (2009)
  • 著者名/発表者名: Mai Yoshikawa, Yohei Mukai, Hiroko Shibata, Yasuo Yoshioka, Yasuhiro Abe, Tetsuya Nomura, Madoka Taniai, Tsunetaka Ohta, Shin-ichi Tsunoda, Haruhiko Kamada, Shinsaku Nakagawa, Yasuo Tsutsumi
  • 学会等名: 12th International TNF Conference
  • 発表場所: Madrid (Spain)
  • 年月日: 20090426-20090429
• [学会発表] Antibody-drug conjugateの開発に適う細胞内侵入抗体の効率的探索法 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉川舞、向洋平、吉岡靖雄、岡田直貴、堤康央、角田慎一、中川晋作
  • 学会等名: 第8回ファーマ・バイオフォーラム
  • 発表場所: 名古屋
  • 年月日: 2009-11-14
• [学会発表] High-throughput screening method of "Cell-internalizing monoclonal antibodies", potent anti-tumor drug delivery carriers (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉川舞、向洋平、吉岡靖雄、岡田直貴、堤康央、角田慎一、中川晋作
  • 学会等名: 第68回日本癌学会学術総会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2009-10-02
• [学会発表] 金磁性複合ナノ粒子のバイオ・DDS分野への展開 (2009)
  • 著者名/発表者名: 向洋平
  • 学会等名: 第3回「ナノメディスン・アプリケーション研究会」
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-09-16
• [学会発表] 金磁性複合ナノ粒子のバイオ分野への応用 (2009)
  • 著者名/発表者名: 向洋平
  • 学会等名: 第31回ナノバイオ磁気工学専門研究会
  • 発表場所: 大阪
  • 年月日: 2009-07-23
• [学会発表] immuno-conjugate製剤の開発に適う細胞内侵入抗体の効率的創製法の確立 (2009)
  • 著者名/発表者名: 吉川舞、向洋平、久保貴、吉岡靖雄、岡田直貴、堤康央、角田慎一、中川晋作
  • 学会等名: 日本薬剤学会第24年会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2009-05-22
• [学会発表] 微細超常磁性酸化鉄粒子(USPIO)をコアとしたPEG化金磁性ナノ粒子の創製とそのMRI腫瘍造影剤としての有用性評価 (2009)
  • 著者名/発表者名: 小島拓記、向洋平、森田将史、犬伏俊郎、山本孝夫、吉岡靖雄、岡田直貴、清野智史、中川晋作
  • 学会等名: 日本薬剤学会第24年会
  • 発表場所: 静岡
  • 年月日: 2009-05-22
• [学会発表] TNFR1選択的阻害剤の開発を目指したTNFR1選択的変異体の創製とそのレセプター結合における構造-活性相関研究 (2009)
  • 著者名/発表者名: 向洋平、柴田寛子、中村照也、吉岡靖雄、阿部康弘、野村鉄也、谷合まどか、太田恒考、池水信二、鎌田春彦、角田慎一、中川晋作、山縣ゆり子、堤康央
  • 学会等名: 第9回蛋白質科学会年会
  • 発表場所: 熊本
  • 年月日: 2009-05-21
• [学会発表] STLUCTURE-FUNCTION RELATIONSHIP OF TNF BASED ON 3D STRUCTURAL ANALYSIS OF FULLY ACTIVE TNFR1-SELECTIVE TNF MUTANT (2008)
  • 著者名/発表者名: Yohei Mukai, Hiroko Shibata, Teruya Nakamura, Yasuo Yoshioka, Yasuhiro Abe, Tetsuya Nomura, Madoka Taniai, Tsunetaka Ohta, Shinji Ikemizu, Shinsaku Nakagawa, Shin-ichi Tsunoda, Haruhiko Kamada, Yuriko Yamagata, Yasuo Tsutsumi
  • 学会等名: Cytokine 2008
  • 発表場所: Montreal, CANADA
  • 年月日: 20081000
• [学会発表] Direct Cell-entry of Gold/iron-oxide Magnetic Nanoparticles Enhanced Adenovirus Mediated Gene Expression in Adenovirus-resistant cells (2008)
  • 著者名/発表者名: Kamei K, Yoshikawa T, Kojima H, Seino S, Yamamoto T A, Yoshioka Y, Okada N, Mukai Y, Nakagawa S
  • 学会等名: 7th international conference on the scientific and clinical applications of magnetic carriers
  • 発表場所: Vancouver, CANADA
  • 年月日: 20080500
• [備考] 大阪大学研究者総覧(向洋平)
  • URL: http://www.dma.jim.osaka-u.ac.jp/kg-portal/aspI/RX0011D.asp?UNO=15207&page=1