| 研究概要 |
本研究を開始するにあたり、まず最初にグリオーマ幹細胞の選択的培養を試みた。無血清培地にEGF,FGF2,B27supplementを添加した幹細胞培養条件にて培養を行ったところ、グリオーマ細胞株の中に培養プレートに接着せず球形の細胞塊(tumor sphere)を形成するものの存在が確認された。さらにこのようなtumor sphereを構成する細胞について幹細胞マーカーの発現を検討したところ、幹細胞培養状態で幹細胞マーカーの発現亢進が認められた。また、幹細胞培養法で選択的に増幅したグリオーマ細胞は血清を含む培地で培養した同種の細胞よりも造腫瘍能が亢進ていることも確認できた。
次にこのような幹細胞培養条件下で維持増幅されるグリオーマ幹細胞の維持増殖に関わる分子の探索を行った。細胞内機能性分子に対する阻害剤等を用いて種々の検討を行ったところ、tumor sphereの形成を抑制する薬剤の存在が明らかとなった。Tumor sphere形成の抑制が単なる増殖・生存抑制によるものか、あるいは幹細胞性そのものの抑制によるものかを検討するため幹細胞マーカー発現についても調べてみたところ、この薬剤により幹細胞マーカー発現も抑制されることが確認できた。これらの結果はこの薬剤の標的分子がグリオーマ幹細胞の幹細胞性維持に関わっている可能性を示唆するものである。次いでこの薬剤で予め処理したグリオーマ幹細胞をヌードマウスに移植したところ、明らかに造腫瘍能の低下が認められた。これらの結果から、本研究で見いだしたこの薬剤はグリオーマ幹細胞の機能阻害を通じて腫瘍形成を抑制する効果をもち、将来有効なグリオーマ治療法となる可能性があるものと考えられた。
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