高病原性トリインフルエンザが哺乳類呼吸器細胞にアポトーシスを誘導する機構の解明

2009 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20790710
• 研究機関: 大阪大学
• 研究代表者: 大道寺 智 大阪大学, 微生物病研究所, 特任研究員 (80432433)
• キーワード: 高病原性トリインフルエンザ / アポトーシス

研究概要

前年度までの研究で高病原性トリインフルエンザウイルスであるA/Crow/Kyoto/53/2004(H5N1)は哺乳動物の呼吸器上皮としてのブタ初代肺胞上皮細胞にアポトーシスを誘導し、その誘導にはH5N1のHemagglutinin(HA)蛋白質が深く関与していることがわかった。本年度はH5N1のその他の遺伝子の関与について評価するために、リバースジェネティクス法によりそれぞれのH5N1の遺伝子を持つ各種ミュータントを作成しH5N1のHA以外の遺伝子のアポトーシス誘導への関与について検討を行った。
各種recombinant H5N3(rH5N3)をブタ肺胞上皮細胞に感染させその細胞傷害性とアポトーシス誘導能について評価を行ったところH5N1のHA以外の遺伝子をもつrecombinant H5N3ではアポトーシスを誘導しないことがわかった。またさらにH5N1のHA蛋白質のうちアポトーシス誘導に関与するH5N1のHAのアミノ酸配列を同定するために本来アポトーシスを誘導しないH5N3とH5N1のHAとのキメラのHAを作成しこれをH5N3に導入しアポトーシス誘導に関与しているアミノ酸の同定を試みたところHAの81-340アミノ酸領域のみをH5N1に変えたH5N3のウイルスでアポトーシスの誘導が認められた。
以上の結果よりブタ肺胞上皮細胞におけるH5N1のアポトーシス誘導にはそのHA蛋白質が主に関与ししかもその前半の81-340アミノ酸が重要である可能性が示唆された。
現在はH5N1HA、H5N3HAの蛋白質立体構造上の違いと病原性との関連性について検討を行っている。またそれぞれのHA蛋白質と宿主内で相互作用する細胞死に関連した宿主因子について探索を行っている。

研究成果

• [雑誌論文] Highly Pathogenic H5N1 Avian Influenza Virus Induces Extracellular Ca2+ Influx, Leading to Apoptosis in Avian Cells (2010)
  • 著者名/発表者名: Ueda M, Daidoji T, Du A, Yang CS, Ibrahim MS, Ikuta K, Nakaya T.
  • 雑誌名: J Virol. 6(Now in press)
  • 査読あり
• [雑誌論文] Disposition of flavonoids via enteric recycling : UDP-glucuronosyltrans ferase (UGT) 1As deficiency in Gunn rats is compensated by increases in UGT2Bs activities. (2009)
  • 著者名/発表者名: Wang SW, Kulkarni KH, Tang L, Wang JR, Yin T, Daidoji T, Yokota H, Hu M.
  • 雑誌名: J Pharmacol Exp Ther. 329 ページ: 1023-1031
  • 査読あり
• [雑誌論文] Broad and potent anti-influenza virus spectrum of epigallocatechin-3-O-gallate-monopalmitate. (2009)
  • 著者名/発表者名: Kaihatsu K, Mori S, Matsumura H, Daidoji T, Kawakami C, Kurata H, Nakaya T, Kato N.
  • 雑誌名: J Mol Genet Med. 2 ページ: 195-197
  • 査読あり
• [学会発表] 高病原性鳥インフルエンザウイルスH5N1の細胞傷害誘導に関係するHA領域の検討 (2009)
  • 著者名/発表者名: 大道寺智、中村昇太、Chandimal de Silva、上田真世、ドゥアナリワ、楊成松、生田和良、中屋隆明
  • 学会等名: 第57回日本ウイルス学会学術集会
  • 発表場所: 都市センターホテル(東京)
  • 年月日: 2009-10-25
• [学会発表] One-step immunochromatographic assay for asian H5N1 detection (2009)
  • 著者名/発表者名: Tomo Daidoji, Anariwa Du, Yusuke Shibai, Daisuke Ito, Mayo Ueda, Cheng-Song Yang, Hisahiko Iwamoto, Kazuyoshi Ikuta, Takaaki Nakaya
  • 学会等名: International Joint Forum on Infectious Diseases
  • 発表場所: Siam City Hotel, Bangkok, Thailand
  • 年月日: 2009-09-16