| 研究概要 |
11q23転座型やPhiladelphia染色体を含む症例の小児急性リンパ性白血病(ALL)は未だ難治である。これらを含む腫瘍細胞に対してエピジェネティックに作用するピストン脱アセチル化阻害剤(HDAC inhibitor)が細胞死や細胞周期停止を誘導することが知られているがその機序は不明な点が多く残っている。小児ALL細胞株に対するHDAC inhibitorの細胞死、細胞周期停止の誘導の作用機序を解析した。
HDAC inhibitorであるTSAを添加することでT-lineage ALL、B-precursor ALLともに細胞死が誘導された。pro-apoptotic蛋白であるBakやBidの発現増加、anti-apoptotic蛋白であるBcl-xLの発現低下が共通し、T-lineage ALLではPUMAの発現増加、B-precursor ALLではBimの発現増加を認めた。
TSAの添加でT-lineage ALLでG2/M期、B-precursor ALLでG0/G1期に細胞周期停止を来すことがPI stainingを用いて確認された。細胞周期関連蛋白をWestern blotting法を用いて解析を行い、T-lineage ALLではリン酸化CDC25C、リン酸化CDC2の発現が増加、B-precursor ALLではp21の発現増加が確認された。
細胞周期と細胞死の関連を解析するためにcaspase 3/cyclins staining法を用いてフローサイトメーターで解析を行った。TSA添加によりT-lineage, B-precursor ALLともcaspase 3の増加を認め、前者ではcyclin A, B1の発現増加を来し、後者では逆にcyclin A, B1の発現減少を認めた。
今後これらの差異に関して解析を進めていく予定である。
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