構造生物学的手法による自然免疫及びIL-18機能制御と新規免疫調節薬の開発

2010 年度 研究成果報告書

• 研究課題/領域番号: 20790723
• 研究種目: 若手研究(B)
• 配分区分: 補助金
• 研究分野: 小児科学
• 研究機関: 岐阜大学
• 研究代表者: 大西 秀典 岐阜大学, 医学部附属病院, 助教 (60381620)
• 研究期間 (年度): 2008 – 2010
• キーワード: 自然免疫 / IL-18 / Toll-like receptor / MyD88 / タンパク立体構造

研究概要

MyD88は、Toll様受容体及びIL-1/IL-18シグナルを細胞内で中継する重要なアダプター分子である。本研究では、MyD88のタンパク立体構造解析及びタンパク間相互作用の検討を通じて、自然免疫系及び特にIL-18シグナルを制御しうる分子の作成を目的とした研究を進めた。本研究期間中に、TIRドメイン分子同士の相互作用の計測に有効な手法を確立し、MyD88と結合するとされるTIRドメイン含有分子群の直接結合の特異性を決定した。またアミノ酸残基レベルで相互作用様式を決定した。MyD88に相互作用する薬剤をスクリーニングするためのツールとして、1H-15N HSQC 2次元スペクトルの情報を、BMRBデータベース(No.11078)に登録した。MyD88ドミナントネガティブ変異分子(DN)に細胞内タンパク導入ドメイン(PTD)を付加したPTD-MyD88-DNの構築を行った。今後、ヘテロTIRドメイン複合体構造の決定、及びMyD88を標的とした薬剤の開発を進める予定である。

研究成果

• [雑誌論文] Genetic variations in MyD88 adaptor-like are associated with atopic dermatitis. (2011)
  • 著者名/発表者名: An Y, Ohnishi H, Matsui E, Funato M, Kato Z, Teramoto T, Kaneko H, Kimura T, Kubota K, Kasahara K, Kondo N.
  • 雑誌名: Int J Mol Med. 27(6) ページ: 795-801
  • 査読あり
• [雑誌論文] Antigen-specific immune response to endotoxin-free recombinant P34 (2011)
  • 著者名/発表者名: Morita H, Kaneko H, Ohnishi H, Kato Z, Kondo N.
  • 雑誌名: .Allergy.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Efficacy of the slow dose-up method for specific oral tolerance induction in children with cow's milk allergy : comparison with reported protocols. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kaneko H, Teramoto T, Kondo M, Morita H, Ohnishi H, Orii K, Matsui E, Kondo N.
  • 雑誌名: J Investig Allergol Clin Immunol. 20(6) ページ: 538-539
  • 査読あり
• [雑誌論文] Mutation in the Q28SDD31SD site, but not in the two SQ sites of the survival of motor neuron protein, affects its foci formation. (2010)
  • 著者名/発表者名: Aoki Y, Fukao T, Zhang G, Ohnishi H, Kondo N.
  • 雑誌名: Int J Mol Med. 26(5) ページ: 667-671
  • 査読あり
• [雑誌論文] Interleukin-17 expression in the urticarial rash of familial cold autoinflammatory syndrome : a case report. (2010)
  • 著者名/発表者名: Yamauchi A, Iwata H, Ohnishi H, Teramoto T, Kondo N, Seishima M.
  • 雑誌名: Br J Dermatol. 163(6) ページ: 1351-1353
  • 査読あり
• [雑誌論文] 1H, 13C, and 15N resonance assignment of the TIR domain of human MyD88. (2010)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi H, Tochio H, Kato Z, Kimura T, Hiroaki H, Kondo N, Shirakawa M.
  • 雑誌名: Biomol NMR Assign. 4(2) ページ: 123-125
  • 査読あり
• [雑誌論文] Prediction of the pathogenesis of the mutation in MeCP2 C-terminal domain. (2010)
  • 著者名/発表者名: Kato Z, Ohnishi H, Kimura T, Kondo N.
  • 雑誌名: Brain Dev. 32(2) ページ: 169
  • 査読あり
• [雑誌論文] Structural basis for the multiple interactions of the MyD88 TIR domain in TLR4 signaling. (2009)
  • 著者名/発表者名: Ohnishi H, Tochio H, Kato Z, Orii KE, Li A, Kimura T, Hiroaki H, Kondo N, Shirakawa M.
  • 雑誌名: Proc Natl Acad Sci USA. 106(25) ページ: 10260-10265
  • 査読あり
• [雑誌論文] Expression, purification and structural analysis of human IL-18 binding protein : a potent therapeutic molecule for allergy. (2008)
  • 著者名/発表者名: Kimura T, Kato Z, Ohnishi H, Tochio H, Shirakawa M, Kondo N.
  • 雑誌名: Allergol Int. 57(4) ページ: 367-376
  • 査読あり
• [雑誌論文] Hypothermia augments NF-kappaB activity and the production of IL-12 and IFN-gamma. (2008)
  • 著者名/発表者名: Arai T, Kaneko H, Ohnishi H, Matsui E, Fukao T, Kawamoto N, Kasahara K, Kondo N.
  • 雑誌名: Allergol Int. 57(4) ページ: 331-338
  • 査読あり
• [雑誌論文] A novel polymorphism, E254K, in the 5-lipoxygenase gene associated with bronchial asthma. (2008)
  • 著者名/発表者名: Bai C, Matsui E, Ohnishi H, Kimata K, Kasahara K, Kaneko H, Kato Z, Fukao T, Kondo N.
  • 雑誌名: Int J Mol Med. 21(2) ページ: 139-144
  • 査読あり
• [学会発表] 自然免疫異常症、アレルギー疾患病態解明に向けたプロテオミクス的手法の応用 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大西秀典、加藤善一郎、木村豪、安陽、久保田一生、松井永子、金子英雄、近藤直実
  • 学会等名: 第47回日本小児アレルギー学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 20101204-20101205
• [学会発表] Structural basis for the innate immune deficiency syndrome. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hidenori Ohnishi, Hidehito Tochio, Zenichiro Kato, Takeshi Kimura, Masatoshi Nada, Kazuo Kubota, Masahiro Shirakawa, Naomi Kondo.
  • 学会等名: The 8th Asia Pacific Congress of Allergy, Asthma and Clinical Immunology 2010.
  • 発表場所: Singapore.
  • 年月日: 20101106-20101109
• [学会発表] The LPS induced enhancement of IL-1β and IL-18 production is a useful tool for diagnosis of familial cold inflammatory syndrome (FCAS). (2010)
  • 著者名/発表者名: Hidenori Ohnishi, Takahide Teramoto, Zenichiro Kato, Hideo Kaneko, Ryuta Nishikomori, Naomi Kondo.
  • 学会等名: Autoinflammation 2010.
  • 発表場所: Amsterdam, Netherlands.
  • 年月日: 20100902-20100906
• [学会発表] A conserved interaction mode between MyD88 and distinct membrane-sorting adaptors in TLR4 and IL-18 signaling. (2010)
  • 著者名/発表者名: H.Ohnishi, H.Tochio, Z.Kato, T.Kimura, T.Funasaka, R.W.Wong, M.Shirakawa, N.Kondo.
  • 学会等名: 14th International Congress of Immunology.
  • 発表場所: Kobe.
  • 年月日: 20100822-20100827
• [学会発表] Structural basis for the interactions of the MyD88 TIR domain in TLR4 signaling. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hidenori Ohnishi, Hidehito Tochio, ZenichiroKato, Takeshi Kimura, Naomi Kondo, Masahiro Shirakawa.
  • 学会等名: World wide magnetic resonance conference 2010.
  • 発表場所: Florence, Italy.
  • 年月日: 20100704-20100709
• [学会発表] The genetic variations of the MyD88 adaptor protein like (Mal) are associated with allergic diseases in Japanese population. (2010)
  • 著者名/発表者名: Hidenori Ohnishi, Yang An, Eiko Matsui, Zenichiro Kato, Hideo Kaneko, Naomi Kondo.
  • 学会等名: The 20th Interasma Japan/North Asia.
  • 発表場所: Tokyo.
  • 年月日: 20100702-20100703
• [学会発表] 乳児栄養の役割:母乳・人工乳 (2010)
  • 著者名/発表者名: 大西秀典、金子英雄、森田秀行、川本美奈子、松井永子、加藤善一郎、近藤直実
  • 学会等名: 第113回日本小児科学会学術集会
  • 発表場所: 盛岡
  • 年月日: 20100423-20100426
• [学会発表] アレルギー発症にかかわる分子の構造学的解明と臨床応用 (2008)
  • 著者名/発表者名: 大西秀典, 加藤善一郎, 木村豪, 徳見哲史, 福富悌, 近藤直実
  • 学会等名: 第45回日本小児アレルギー学会
  • 発表場所: 横浜
  • 年月日: 2008-12-14
• [図書] Genetics of Pediatric Asthma.(Allergy Frontiers (volumel Allergy Frontiers : Epigenetics, Allergens and Risk Factors))(Pawankar R, Holgate ST, Rosenwasser LJ eds.) (2009)
  • 著者名/発表者名: Kondo N, Matsui E, Kaneko H, Fukao T, Teramoto T, Kato Z, Ohnishi H, Nishimura A
  • 総ページ数: 442
• [備考] ホームページ等
• [産業財産権] 変異導入MyD88蛋白によるToll様受容体/インターロイキン18シグナルの特異的制御法 (2008)
  • 発明者名: 近藤直実、加藤善一郎、大西秀典、白川昌宏、杤尾豪人
  • 権利者名: 岐阜大学、京都大学
  • 産業財産権番号: PCT/JP,2008/064170
  • 出願年月日: 2008-07-31
  • 外国