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重症型表皮水疱症のモデル動物(VII型コラーゲンノックアウトマウス:Col7 KO)に対してトランスジェニック救済実験を行い、遺伝子治療の有用性を生体レベルで検証する。
1.Col7 KOマウスの供与を受け、C57BLマウスに戻し交配を行った。
2.ヒトVII型コラーゲン遺伝子を表皮角化細胞に強制発現させるトランスジェニックマウス(Tgm)、真皮線維芽細胞に発現させるTgm、マウス個体の全細胞に発現させるTgmをマイクロインジェクション法により作成した。
3.Col7 KOマウスのヘテロと3系統それぞれのTgmとの交配を繰り返し、ヒトCOL7遺伝子のみをもつレスキューマウスを作成(救済実験)した。
4.3系統いずれの救済実験においても、その外観、成長においてWild typeと差異は認めなかった。また、電顕所見において係留線維の形成を認めた。
5.係留線維がヒト化されたいずれの系統(レスキューマウス)の長期観察においても生存予後はWild typeと差異はなく、水疱の出現は認めなかった。
6.臨床に近い状態を表現させるため導入ヒトCOL7遺伝子に変異をもつTgmを作成しレスキュー実験を行ったところ、ヒト表皮水疱症と同様臨床像を呈する新規の長期生存可能な表皮水疱症モデルマウスを作成することができた。
以上の結果より、表皮水疱症において、表皮、真皮のいずれに遺伝子を導入しても、基底膜部に機能的な係留線維を形成しうることが生体内で証明され、将来遺伝子治療が行われる際への大きな提言となった。また、変異遺伝子を導入することによりヒト表皮水疱症と同様の臨床像を呈する長期生存マウスの開発に成功したことは、今後の疾患治療実験に使用できるばかりではなく、個々の表皮水疱症患者における変異遺伝子がもたらす疾患予後の推測やテーラーメイド医療開発にも繋がる非常に意義が大きい重要性のある研究であると考える。
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