| 研究概要 |
1. cMyc-ERトランスジェニックマウスの作成
CAGプロモーター下にヒトc-Mycとエストロゲンレセプターとの融合遺伝子を発現させる遺伝子を導入したcMycERトランスジェニックマウスの作出に成功した.これらを互いに交配させ,ホモ接合体のcMycERトランスシェニックマウスを得ることができた.
2. cMyc-ERホモ接合体マウスの表現型解析
成体ならびに胎仔トランスジェニックマウスより肝細胞を獲得し,これに40HTを添加して培養することにより,胎仔肝細胞のみが細胞増殖を繰り返すことを確認できた.さらに形態的にも,敷石上の上皮細胞であり,肝細胞であることが確認できた.
3. in vitroでのモデルとしての胆管癌細胞株を使った実験.
in vitroにおいて癌幹細胞の存在の有無を確認するために次のような実験を行った.癌幹細胞と組織幹細胞とは多くの共通点を持つことから,胆管癌において癌幹細胞が存在するならば肝幹細胞/前駆細胞と共通のマーカー発現をしてることが予想される.そこで我々は肝幹細胞/前駆細胞の代表的なマーカーであるAFPに注目し,AFPプロモーター下にEGFPを発現するベクターを胆管癌細胞株に遺伝子導入した.AFP陽性胆管癌細胞は,自己複製能と分化能,造腫瘍性を有しているのに対し,AFP陰性細胞は自己複製能しか有しておらず,AFPは胆管癌の癌幹細胞マーカーとして有用であることが示唆された.
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