| 研究概要 |
高齢化社会を迎えて、益々増加する骨・軟骨疾患の治療に対して再生医療は今もっとも注目されている。本研究では、再生医療への応用が期待できる組織再生因子CCN2の内軟骨性骨化における多様な生理作用と細胞外環境因子との関連を解明するために、1)マウス脛骨における二次骨化中心形成において、その遺伝子発現とタンパクの局在をin situ hybridization法と免疫染色法によって経時的に組織学的検討を行い、二次骨化中心形成過程におけるCCN2の生理作用について検討する。2)同時にCCN2が特異的に集積するパールカン陽性細胞の細胞外環境について細胞外マトリックス(パールカン)と細胞外プロテアーゼの局在について免疫染色法を用いて経時的に組織学的検討を加える。3)上記の結果をあわせることにより、二次骨化中心過程におけるCCN2の作用機構について細胞外環境因子を含めた精密な解析を行うことを目的とする。実験動物にはマウスを用い、二次骨化中心形成過程(生後1, 3, 7, 14, 28日)における膝関節組織を摘出した。各群4匹(計20匹)。その後、通法に従いパラフィン包埋を行い、厚さ7μmの連続切片を作製した。現在までに、本研究を遂行するためにCCN2の免疫染色ならびにin situ hybridizationを行っている。同時に、遺伝子発現部位やタンパク局在部位に共局在する他分子との関連を調べるために、軟骨組織の細胞外マトリックスの主要成分の一つであるX 型コラーゲンのin situ hybridization用のprobeを作製しているところである。
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