| 研究概要 |
本研究では、DNAマイクロアレイを用いて口腔癌の遺伝子発現プロファイルを網羅的に解析し、口腔癌細胞の増殖・転移に関与する因子を特定するとともに、上記の分子標的治療阻害剤キットを用いて、増殖・転移機構のシグナル経路を詳細に解析し、その生物学的意義を検討した。
(1)口腔扁平上皮癌における遺伝子発現プロファイルの解析
ヒト口腔扁平上皮癌細胞株よりmRNAを抽出、in vitro transcriptionで増幅する。これをサンプルとして、GeneChip Expression Analysis System (Affymetrix, USA)で遺伝子発現プロファイルの網羅的解析を行った。これを、正常口腔粘膜の粘膜固有層の遺伝子発現プロファイルと比較した。
(2)分子標的治療阻害剤キットでの解析
(1)に用いた細胞を単層培養し、190種類の阻害剤による増殖抑制効果をMTT assayにて解析し、抑制効果の高い因子を同定した。
(3)増殖抑制効果を示した阻害因子の発現解析
(2)で高い増殖抑制効果を示した因子について、各細胞よりタンパクを抽出し、Western blottingにて解析した。
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