研究課題
がんの分子標的治療薬開発は、がん遺伝子産物の活性制御を狙ったものが主流だが、耐性獲得や不応性の存在、創薬フィージビリティの低さにより期待通りの効果を見込めないことが多い。研究代表者らは耐性獲得にも対応出来る新たな概念に基づいた既存の治療戦略として、がん抑制因子の抑制活性を利用した治療薬の開発を目指し、乳がん細胞にて多岐のがん関連シグナルの抑制活性を有するがん抑制因子PHB2(Prohibitin 2)に着目してきた。詳細な機能解析の結果、エストロゲン受容体(ER）陽性乳がん細胞の細胞質において、我々が同定したがん特異的足場タンパク質BIG3がPHB2と結合し、その抑制機能を制御すること、さらに「BIG3-PHB2相互作用阻害ペプチド(stERAP)」を開発し、BIG3から解放されたPHB2の抑制活性を利用した新たな治療法を提唱した。本研究では、HER2陽性乳がん、トリプルネガティブ(TNBC:ホルモン受容体、HER2陰性)乳がんおよび治療耐性乳がん細胞におけるBIG3-PHB2複合体の役割の解明およびstERAPの新規治療法としての可能性について検討する。本年度は、昨年度明らかにしたHER2陽性乳がん細胞にてTGN（トランスゴルジネットワーク）に局在するBIG3-PHB2複合体の役割解明およびtrastuzumab耐性HER2陽性乳がん細胞にて、BIG3-PHB2複合体のTGNから細胞膜への局在移行の分子機構を明らかにした。続いて、HER2陽性乳がん臨床検体を用いた免疫組織染色によるBIG3の発現量およびPHB2リン酸化と予後との相関を確認した。さらに、TNBC細胞においてミトコンドリアに局在するBIG3-PHB2複合体が内膜と外膜を橋渡しするように複数のミトコンドリアタンパク質群と相互作用することを明らかにした。
2: おおむね順調に進展している
（１）HER2陽性乳がん細胞におけるBIG3-PHB2複合体の役割解明① HER2陽性（trastuzumab感受性）細胞では、BIG3-PHB2複合体はTGNに局在するが、stERAP投与によるBIG3-PHB2相互作用阻害にて、タンパク質の細胞外への分泌が阻害されることを明らかにした。② trastuzumab耐性細胞において、EGFRの過剰発現にてBIG3およびPHB2はそれぞれリン酸化をされ、その後小胞輸送関連因子によってリサイクリングエンドソームへ移行することを確認した。一方、EGFRの過剰発現によって、HEE2およびEGFR自身がエンドサイトーシスを通じて細胞内に取り込まれた後に、リサイクリングエンドソーム上にてBIG3-PHB2と相互作用し、その後細胞膜直下に移行されることを明らかにした。（２）HER2陽性乳がん臨床検体を用いたBIG3-PHB2の予後相関解析HER2陽性乳がん臨床検体を用いた免疫組織染色によるBIG3の発現量およびPHB2リン酸化と予後をはじめとした各種臨床所見との相関解析を行った。その結果、BIG3の高発現もしくはPHB2リン酸化を認めない症例は予後不良であることがわかった。特に、BIG3が細胞膜に局在する多くの症例はEGFRが高発現し、再発が認められた。（３）TNBC細胞におけるBIG3-PHB2複合体の相互作用分子の同定TNBC細胞のミトコンドリアに局在するBIG3-PHB2複合体は、内膜に局在するANT2/3および外膜に局在するVDACをはじめとした複数のミトコンドリアタンパク質群と相互作用することで内膜と外膜を橋渡しするように局在することを明らかにした。
HER2陽性（trastuzumab感受性）乳がん細胞におけるBIG3-PHB2複合体の役割に解明については、TGNにおける相互作用分子の同定を通じた分泌制御機構の解明を進める。HER2陽性（trastuzumab耐性）乳がん細胞における治療耐性を引き起こす分子機構では、膜直下における相互作用分子の同定を通じたシグナル増強の分子機構の解明を進める。さらに、stERAP投与にてPHB2よりBIG3が解離した際のPHB2のリン酸化の意義解明について、stERAP投与時に、PHB2にリクルートされるタンパク質群の同定をすすめる。さらに、BIG3高発現TNBC細胞におけるミトコンドリア局在型BIG3-PHB2複合体の役割解明について、ミトコンドリアのROS、膜電位への影響について経時的な変化の観察および、その相互作用分子への影響を通じて明らかにする。さらに、R4年度は、TNBCの抗腫瘍効果をin vitro, in vivoで検討する。
すべて 2022 2021
すべて 雑誌論文 (2件) (うち査読あり 2件、 オープンアクセス 2件) 学会発表 (10件) (うち招待講演 1件)
J Hum Genet.
巻: 66 ページ: 927-935
10.1038/s10038-021-00962-6.
Cancer Sci.
巻: 112 ページ: 4208-4219
10.1111/cas.15099.
