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2020 年度 実績報告書

ゲノム編集ニワトリによる高機能インフルエンザワクチンの生産

研究課題

研究課題/領域番号 20H02537
研究機関名古屋大学

研究代表者

西島 謙一  名古屋大学, 生命農学研究科, 教授 (10262891)

研究分担者 小野 悦郎  九州大学, 医学研究院, 教授 (00160903)
金岡 英徳  名古屋大学, 工学研究科, 助教 (30631973)
研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2024-03-31
キーワードニワトリ / 遺伝子改変 / 始原生殖細胞
研究実績の概要

発育鶏卵でインフルエンザウイルスの増殖を左右するのは漿尿膜上に存在する糖鎖の結合パターンであり、理論上ニワトリ型の糖鎖をヒト型化できれば、ヒトウイルスを馴化プロセスなしで増やせるようになる。そこで、本申請ではニワトリの遺伝子改変技術を用いてヒト型糖鎖発現ニワトリを作製することを目指す。安全性を確保するために2系統の遺伝子改変ニワトリを作成する計画であるが、本年度はこの2系統の遺伝子改変始原生殖細胞株を作製しレシピエント胚に移植することで生殖腺キメラを作製した。一部は成熟したため、遺伝子改変された次世代のニワトリを得るために交配とスクリーニングを始めている。この過程で、シアル酸転移酵素の発現がニワトリ細胞の増殖にマイナスに作用することを見いだした。増殖抑制の強度はそれほど大きくないため、発現により発生に悪影響を及ぼす可能性は低いものと考えられたが、この点についてはさらに検討を行う必要がある。組織特異的な発現が必要になる可能性もあり、そのためのモデルとしてリゾチームプロモーターの解析を行った。
また、我々が着目してきたPRDM14遺伝子のニワトリ始原生殖細胞における役割を確認するために、PRDM14を誘導発現可能なコンストラクトを導入する一方、内在性のPRDM14遺伝子を両アレルとも破壊した始原生殖細胞株を作製した。PRDM14の発現量は期待通り制御できたが、調べた範囲で始原生殖細胞の増殖及び遺伝子発現に影響はなかった。実験システムの特性により低レベルのバックグラウンド発現が残るが、この発現により細胞の性質が維持されたものと推定された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

生殖腺キメラについては概ね計画通り作製できている。新所属における遺伝子改変ニワトリの作製作業が軌道に乗りつつあり、交配個体数をさらに増やすことで計画した系統作製は可能であると考えられる。

今後の研究の推進方策

引き続き生殖腺キメラを作製し交配を精力的に進める予定である。また、始原生殖細胞の維持に必要な遺伝子の解析については対象を広げBLIMP1など他の遺伝子についても検討を行う。

  • 研究成果

    (2件)

すべて 2021 2020

すべて 雑誌論文 (1件) (うち査読あり 1件) 学会発表 (1件)

  • [雑誌論文] Regulatory mechanism of chicken lysozyme gene expression in oviducts examined using transgenic technology2021

    • 著者名/発表者名
      Kojima Yusuke、Okuzaki Yuya、Nishijima Ken-ichi、Moriwaki Shuichiro、Asai Seiya、Kaneoka Hidenori、Iijima Shinji
    • 雑誌名

      Journal of Bioscience and Bioengineering

      巻: 131 ページ: 453~459

    • DOI

      10.1016/j.jbiosc.2020.11.011

    • 査読あり
  • [学会発表] ニワトリシアル酸転移酵素のインフルエンザワクチン生産効率化への応用2020

    • 著者名/発表者名
      牧田芳隆,奥嵜雄也,佐野観月,金岡英徳,飯島信司,西島謙一
    • 学会等名
      糖鎖科学中部拠点 第16回 「若手の力」フォーラム

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公開日: 2021-12-27  

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