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2023 年度 実績報告書

ゲノム編集ニワトリによる高機能インフルエンザワクチンの生産

研究課題

研究課題/領域番号 20H02537
研究機関名古屋大学

研究代表者

西島 謙一  名古屋大学, 生命農学研究科, 教授 (10262891)

研究分担者 金岡 英徳  愛知工業大学, 工学部, 准教授 (30631973)
研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2024-03-31
キーワードニワトリ / 発育鶏卵 / 始原生殖細胞 / 遺伝子改変 / ワクチン
研究実績の概要

1.発育鶏卵でインフルエンザウイルス株の増殖には漿尿膜上に存在する糖鎖が必要であり、この糖鎖をヒト型化できれば、理論上ヒトウイルスを馴化プロセスなしで増やせるようになる。また、発育鶏卵での増殖が極端に低いワクチン株を効率よく増殖させることが可能となる。このために、Creリコンビナーゼを発現するニワトリと、プロモーターと糖転移酵素の間をスタッファーで区切った2種のニワトリ系統が必要となるが、後者の遺伝子導入PGCを移植した胚を孵化させて得た生殖腺キメラニワトリの交配を進めた。その結果目的のトランスジェニックニワトリ系統の樹立に成功した。生まれた個体はスタッファーとして挿入した蛍光タンパク質遺伝子を強く発現しており、スタッファーを除去した際には目的遺伝子を強く発現できることが期待された。成熟後の2系統のニワトリの交配を開始している。得られた卵を解析することで糖鎖変換とインフルエンザウイルスの増殖を評価する必要がある。
2.過剰発現させると培養PGCの増殖を阻害する糖転移酵素について、哺乳類においては酵素活性を失わせることが既知の変異体の遺伝子を導入したところ、やはり増殖が阻害されることが観察された。酵素活性に寄らない影響がある可能性が示唆される一方、酵素活性による影響の程度を評価する必要があることが示された。定量的な解析を行うための発現系を作製中である。
3. 減数分裂関連遺伝子の1つを片アレルでのみノックアウトしたPGCを移植して作製した生殖腺キメラニワトリを成熟させ、精子を採取して調べたところ移植したPGC由来の精子が含まれていることが示された。この個体を正常雌と交配し得られた次世代個体をスクリーニングしたが、目的のノックアウトニワトリは得られなかった。

現在までの達成度 (段落)

令和5年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和5年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (7件)

すべて 2023

すべて 学会発表 (7件) (うち国際学会 5件、 招待講演 2件)

  • [学会発表] Cultivation of chicken primordial germ cells from the chickens at Avian Bioscience Research Sciences Center, Nagoya University2023

    • 著者名/発表者名
      Yuya Okuzaki, Mitsuo Nunome, Takayuki Suzuki, Yoichi Matsuda, Yumi Ozaki, Takeo Uemura, Ken-ichi Nishijima
    • 学会等名
      11th Avian Model Systems Meeting
    • 国際学会
  • [学会発表] Development of the transgenic chicken constitutively-expressing Streptococcus pyogenes Cas92023

    • 著者名/発表者名
      Yukiko Kondo, Yuya Okuzaki, Ken-ichi Nishijima
    • 学会等名
      36th Annual and International Meeting of the Japanese Association for Animal Cell Technology (JAACT2023)
    • 国際学会
  • [学会発表] Knockout of Chicken Fucosyltransferase 8 Towards The Production System of Pharmaceutical Antibodies2023

    • 著者名/発表者名
      Kohei Fujiwara, Yuya Okuzaki, Ken-ichi Nishijima
    • 学会等名
      36th Annual and International Meeting of the Japanese Association for Animal Cell Technology (JAACT2023)
    • 国際学会
  • [学会発表] NBRP ニワトリ・ウズラ - 研究を推進するリソース2023

    • 著者名/発表者名
      西島謙一,塚田光,奥嵜雄也
    • 学会等名
      第47回 鳥類内分泌研究会
  • [学会発表] NBRP ニワトリ・ウズラリソース事業とデザイン型ゲノム育種への夢2023

    • 著者名/発表者名
      西島謙一
    • 学会等名
      令和5年度東海畜産学会大会
    • 招待講演
  • [学会発表] Transgenesis of chicken and quail towards designed-type breeding2023

    • 著者名/発表者名
      Ken-ichi Nishijima
    • 学会等名
      2023 International Symposium on Animal Stem Cells & Biotechnology
    • 国際学会 / 招待講演
  • [学会発表] Development of the SpCas9 constitutively expressing transgenic chicken2023

    • 著者名/発表者名
      Yuya Okuzaki, Yuki Kondo, Ken-ichi Nishijima
    • 学会等名
      11th Avian Model Systems Meeting
    • 国際学会

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公開日: 2024-12-25  

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