研究課題/領域番号 |
20H02896
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研究機関 | 千葉大学 |
研究代表者 |
天知 誠吾 千葉大学, 大学院園芸学研究院, 教授 (80323393)
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研究分担者 |
山村 茂樹 国立研究開発法人国立環境研究所, 地域環境保全領域, 室長 (90414391)
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研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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キーワード | ヨウ素酸呼吸 / Idr / Pseudomonas sp. SCT / IdrABCD / 放射性ヨウ素 |
研究実績の概要 |
ヨウ素酸(IO3-)呼吸細菌Pseudomonas sp. SCTのΔidrA変異株に、広宿主域プラスミドにクローニングしたidrA遺伝子を導入したところ、ヨウ素酸呼吸能を復帰させることができた。これにより、idrA遺伝子がSCT株のヨウ素酸呼吸に必須であることが明らかとなった。また、idr遺伝子の誘導に必要なヨウ素濃度を転写解析により明らかにしたところ、1 uM以上のヨウ素酸で転写誘導される一方、ヨウ化物イオン(I-)では転写は誘導されないことがわかった。さらに、SCT株のヨウ素酸呼吸時に発生すると予想される中間体(HIO)をフェノールと反応させ、ヨードフェノールとして検出することを試みた。その結果、培養に伴って100 uM程度のヨードフェノールが検出され、ヨウ素酸呼吸の中間体がHIOであることを初めて明らかにできた。SCT株のペリプラズム画分より、陰イオン交換クロマトグラフィーおよびゲル濾過クロマトグラフィーにより、異化的ヨウ素酸還元酵素Idrを高純度で含む精製酵素標品を得た。この標品の分子量解析およびLC-MS/MS解析により、IdrはIdrA(99 kDa)、IdrB(21 kDa)、IdrC(42 kDa)、IdrD(41 kDa)の各サブユニットが1つずつ結合したヘテロテトラマーを形成することが強く示唆された。
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現在までの達成度 (段落) |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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今後の研究の推進方策 |
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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