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本研究は、マウス卵巣顆粒層細胞によるエクソソーム分泌に必須のSmpd遺伝子に着目し、その遺伝子欠損マウスの表現型解析を通して、卵巣エクソソームの機能を解明するものである。本年度は、卵巣顆粒層細胞特異的にSmpd4遺伝子を欠損したマウスを作製し、飼育数の増加、表現型解析を行った。当該Smpd4コンディショナルノックアウトマウスでは、卵巣発達動態に異常がみられたものの、卵巣におけるSmpd4遺伝子発現の抑制が十分ではなく、メスは妊孕性を有していた。そのため現在、Smpd4遺伝子の対立遺伝子の一つを全身性に破壊したマウスの作製に取り掛かっている。
また上記のコンディショナルノックアウトマウスではエクソソームの分泌機構をターゲットとしている。このマウスでは卵胞の発達期に異常がみられるため、発達した卵胞内でのエクソソーム機能を解析することが困難である。そこで、発達した卵胞特異的にエクソソームの取り込み機構をターゲットとした遺伝子改変マウスを作製するため、顆粒層細胞におけるエクソソーム取り込み機構解析を昨年度に引き続き行った。昨年度同定した顆粒層細胞におけるエクソソーム取り込みに関与するエンドサイトーシス経路について、さらに詳細な解析を行った。卵母細胞由来の増殖因子などがエンドサイトーシス経路の制御を介してエクソソーム取り込みを制御する可能性など、卵胞内でのエクソソームの取り込み機序について興味深い知見を多数得ることができた。
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