| 研究実績の概要 |
生体でのプロテインノックダウンは，2022年に我々のグループを含めたマウス生体への実装例３例が初めて報告され，現在も世界的に改良が進められており，将来的に広く使用される技術になると考えられる。我々は現在，サリドマイドアナログを用いた簡便なプロテインノックダウン法の開発を目指している。これまで，サリドマイド誘導体は，マウス細胞においてはネオリガンド分解活性を持たないと考えられてきたため，我々はCRBNをヒト化したマウスをゲノム編集により作製し，EGFP-デグロンタグ誘導体の蛍光強度を測定することでプロテインノックダウン効率を評価した。CRBNヒト化マウスは正常に発生し，生殖にも問題がなかった。生体より細胞を採取してEGFP-デグロンタグ融合体の蛍光強度を測定したところ，CRBNヒト化マウス細胞においては，サリドマイドアナログ添加によって10%以下までノックダウンすることが可能であった。さらに生体に移植した癌細胞株の増殖が,サリドマイド誘導体の投与によって抑制されることを示し，生体におけるより精密なタンパク質のノックダウンに成功した。
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