研究課題
本年度は、unbiased screeningにより神経幹細胞の運命転換を司る新規因子の探索を行なった。増殖期とニューロン分化期、そしてグリア分化期の神経幹細胞を採取し、RNA-seqにて遺伝子発現パターンを、またクロマチン相互作用や、エピジェネティクス状態をCUT&TagとATAC-seqにて調べた。Hi-Cの結果を用いて神経幹細胞の時期依存的に発現が変化する遺伝子のプロモーター領域と相互作用する領域を網羅的に調べたところ、その領域はエンハンサーの指標のヒストン修飾が有意に変化していた。この結果から、神経幹細胞の運命転換に関わる新規エンハンサーが同定できた可能性がある。さらにその領域に対してモチーフ解析を実施したところ、様々な転写因子の結合モチーフが得られた。これらの転写因子が神経幹細胞の運命転換を担う新規因子である可能性がある。
1: 当初の計画以上に進展している
本年度新たに実施したHi-Cにより、神経幹細胞の運命転換に関わるエンハンサーの候補を得ることができた。これまでの研究では、神経幹細胞の時期依存的な遺伝子発現変化を司るエンハンサーはとられていない。本研究のエンハンサー候補はこれまでにない全く新しいタイプのエンハンサーである可能性があり興味深い。
本年度得られたエンハンサー候補が実際にエンハンサーとして機能するかをレポーターアッセイやエンハンサー候補領域欠損マウスを作製して調べる。また、そこに結合モチーフのある転写因子のノックアウトや過剰発現を行うことで、実際にそれらが神経幹細胞の運命を司る新規因子であるかどうかを検証する。
すべて 2022 2021
すべて 雑誌論文 (6件) (うち国際共著 1件、 査読あり 6件、 オープンアクセス 5件) 学会発表 (3件) (うち国際学会 1件、 招待講演 1件)
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