多様な選択的オートファジーの分子基盤と生理機能の解明

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20H03213
• 研究機関: 順天堂大学
• 研究代表者: 森下 英晃 順天堂大学, 医学部, 准教授 (90783499)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: 選択的オートファジー / 細胞内品質管理 / リソソーム / ユビキチン

研究実績の概要

本課題は、選択的オートファジーの分子機構や意義を明らかにすることを目的としている。昨年度は主に培養細胞やマウスを用いて、すでに同定されている基質についての選択的オートファジーによる分解の分子機構や意義に関する研究を展開した。具体的には、肝細胞がん細胞株Huh-1（p62液滴に富む）をモデルとして、ゲル様の構造体として集積し分解される選択的基質の成分（ユビキチン化タンパク質やp62がコアを形成）の精製・標識法を改良し効率を向上させた。続いて最新鋭の質量分析計を用いることで、p62陽性構造体に含まれるタンパク質群を網羅的に同定した。新規選択的基質や他のさまざまな選択的オートファジーレセプターが細胞内のp62陽性構造体に集積することも免疫電顕やCLEM法を用いて証明した。さらにオートファジー欠損マウスを用いて、これらの基質の生体内における局在や表現型を解析した。これらの解析を通じて、RNA結合タンパク質を新規基質として同定できたため、その分解のメカニズムや意義について培養細胞、マウスを用いて解析した。これらの成果は選択的オートファジーの基質の多様性を示すものであり、国際誌に論文として投稿した。

現在までの達成度 (段落)

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和4年度が最終年度であるため、記入しない。

研究成果

• [雑誌論文] Role of autophagy in the eye: from physiology to disease. (2022)
  • 著者名/発表者名: Morishita H
  • 雑誌名: Curr. Opi. Physiol. 巻: 30 ページ: 100592
  • DOI: 10.1016/j.cophys.2022.100592
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Role of autophagy in liver diseases. (2022)
  • 著者名/発表者名: Morishita H, Komatsu M
  • 雑誌名: Curr. Opi. Physiol. 巻: 30 ページ: 100594
  • DOI: 10.1016/j.cophys.2022.100594
  • 査読あり
• [雑誌論文] 水晶体における大規模オルガネラ分解の分子機構と生理的意義の解明 (2022)
  • 著者名/発表者名: 森下英晃
  • 雑誌名: 日本白内障学会誌 巻: 34 ページ: 11-14
  • DOI: 10.14938/cataract.34-001
  • 査読あり
• [雑誌論文] Phosphorylation of phase-separated p62 bodies by ULK1 activates a redox-independent stress response (2022)
  • 著者名/発表者名: Ikeda R, Noshiro D, Morishita H, Takada S, Kageyama S, Fujioka Y, Funakoshi T, Komatsu-Hirota S, Arai R, Ryzhii E, Abe M, Koga T, Nakao M, Sakimura K, Horii A, Waguri S, Ichimura Y, Noda NN, Komatsu M.
  • 雑誌名: bioExiv 巻: 1 ページ: 521356
  • DOI: 10.1101/2022.12.21.521356
  • オープンアクセス
• [雑誌論文] 肺の恒常性の維持：肺サーファクタントとオートファジー (2022)
  • 著者名/発表者名: 森下英晃
  • 雑誌名: 呼吸器内科 巻: 42(6) ページ: 633-638
• [学会発表] 選択的オートファジーにより分解される新規超分子複合体の同定 (2022)
  • 著者名/発表者名: 来栖玲央, 藤本侑生, 森下英晃, 高田周平, 和栗聡, 小松雅明
  • 学会等名: 日本顕微鏡学会 第78回学術講演会
• [学会発表] ULK1 キナーゼによる p62 の液―液相分離制御 (2022)
  • 著者名/発表者名: 池田良, 一村義信, 森下英晃, 能代大輔, 船越智子, 小松聡子, 野田展生, 小松雅明
  • 学会等名: 日本Cell Death学会 第30回学会学術集会
• [学会発表] Proteomic approaches to purified p62-bodies and selective autophagy-deficient mice identify a novel substrate for p62-mediated selective autophagy. (2022)
  • 著者名/発表者名: Morishita H, Kurusu R, Fujimoto Y, Takada S, Komatsu M
  • 学会等名: The 10th International Symposium on Autophagy
  • 国際学会
• [学会発表] 水晶体における全オルガネラ分解現象の分子機構と意義の解明 (2022)
  • 著者名/発表者名: 森下英晃
  • 学会等名: 第64回日本脂質生化学会シンポジウム
  • 招待講演
• [学会発表] 肺の恒常性 オートファジーとサーファクタント (2022)
  • 著者名/発表者名: 森下英晃
  • 学会等名: 日本肺サーファクタント・界面医学会第58回学術研究会
  • 招待講演
• [学会発表] Proteomic approach of purified p62-body and selective autophagy-defective mice reveals a novel p62-mediated selective autophagy (2022)
  • 著者名/発表者名: Komatsu M, Kurusu R, Fujimoto Y, Morishita H
  • 学会等名: EMBO Autophagy meeting
  • 国際学会 / 招待講演