|
当教室では，ヒトのCFAP43遺伝子変異が正常圧水頭症の原因の一つであることを明らかにし，病態解析のためにCfap43遺伝子ノックアウトマウスを作出した。Cfap43遺伝子ノックアウトマウスを解析することによって，医療に役立つ水頭症の病態生理を明らかにし，シャント術有効無効例の事前予測因子の取得，水頭症発症のリスク予測，を目標とする。また，motile cilia（運動繊毛）関連の遺伝子群が，日本人の水頭症・認知症のリスク因子であるかを，臨床検体を用いて検証することが，本研究の目的である。
Cfap43 遺伝子ノックアウトマウス（KOマウス）の解析については，シャント術の有効性や，motile cilia が上衣細胞層に発現していることから，脳内上衣細胞層が，水頭症発症のキーとなっている細胞と考えられている。モデルマウスの脳組織凍結切片からマイクロダイセクション法で細胞を集め次世代シークエンサーによる RNA-Seq 発現解析を実施し，p-Value < 0.05，fold change >1.1 or <0.9 の遺伝子247個が特定されている。
運動毛構成タンパク遺伝子群 のpick-upと変異解析は，運動線毛構成タンパク99遺伝子のエクソン領域濃縮キャプチャーと次世代シークエンサー塩基配列解析による遺伝子変異スクリーニング系を立ち上げている。本年は，追加の患者収集ができずに，変異解析は行っていない。
研究実施期間中に，データベースと共同研究によって認める遺伝子を見している。上記99遺伝子の中の4遺伝子にtruncation 型の変異を確認した。多数の患者の解析は見込めないため（N of One），CRISPR/Cas9 法によってそれら遺伝子のノックアウトマウスを作成し，水頭症原因であることの検証を開始した。
|
