浸潤癌モデルの解析では、スキルス胃癌を発症するTff1-Cre;LSL-p53R172H;Cdh1F/F;Tgfbr2F/Fマウスを用いたシングルセル解析・選択的細胞集団RNAseq解析とDigital spatial profilingを施行した。本マウスの腫瘍細胞では正常では発現しないLRG1・CD38が高発現し、間質にはLRG1の受容体CD105を発現する内皮細胞が顕著であったが、内皮細胞の中にCD105陰性細胞とCD105陽性細胞の2分画を認め、CD105陽性細胞ではWnt経路の活性化などの特徴を認め、これが線維芽細胞の活性化を制御していた。また、浸潤型の腸型胃癌マウスモデルであるTff1-Cre;LSL-p53R172H;LSL-KrasG12D;Tgfbr2F/Fを用いた解析も実施し、こちらの腫瘍分画ではAreg1・Slc7a11高発現変化を認め、これらのノックアウトマウスを作成し、腫瘍の縮小を認めた。Areg1は腫瘍内への好中球浸潤に関与していた。EBV型の腫瘍モデルとしてTff1-Cre;LSL-Pik3CaH1047R;Arid1aF/F;p16F/Fマウスを樹立し、この微小環境の解析を行ったところ、腫瘍細胞から産生されるIL33により誘導されるILC2細胞が腫瘍増殖効果を有することが分かった。 幹細胞に対するRspondinシグナルの検討を行うため、tetO-Rspo3過剰発現マウス、およびその受容体のLgr4・Lgr5の条件的ノックアウトマウスを用いた解析を継続した。その結果、Rspo3/Lgr4経路による分化誘導機能が失われると、上記Tff1-Cre;LSL-p53R172H;LSL-KrasG12D;Tgfbr2F/F腸型胃癌マウスモデルにおいて腫瘍増殖・粘膜下浸潤が促進されることが示された。
|