| 研究課題/領域番号 |
20H03847
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| 研究機関 | 東京大学 |
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研究代表者 |
栗田 昌和 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (20424111)
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| 研究分担者 |
金山 幸司 東京大学, 医学部附属病院, 助教 (40612601)
岡崎 睦 東京大学, 医学部附属病院, 教授 (50311618)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 再プログラム化 / 創傷治癒 / アデノ随伴ウイルスベクター / 遺伝子導入 / 上皮化 |
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| 研究実績の概要 |
本研究では申請者が開発を進めてきた「皮膚潰瘍に存在する間葉系細胞から上皮細胞への細胞系譜の転換を介して、潰瘍面から直接的に上皮化、創傷の閉鎖をはかる皮膚潰瘍治療法」の臨床応用へ向けた研究開発を進めている。
特に皮膚皮下組織の間葉系細胞に特化した指向性を有するアデノ随伴ウイルスベクター(AAV)を開発する目的で、AAVの一部をランダム化したペプチドディスプレイウイルスライブラリを作成し、マウス皮膚潰瘍面を用いた定方向進化法をかけることによって新しいカプシドを開発した。既存のAAVカプシドに対する優位性を提示すること、使用に際して最適な方法論を提示することを目的として、特に動物間のばらつき、実験手技によるばらつきの影響を最低限に抑えながら、定量的に比較検討を行う方法について最適化を進めた。
一方、複数の転写因子を単一の細胞に対して同時に遺伝子導入するためのポリシストロニックベクターの開発を目的として、転写因子セットの全配列順に連結したウイルスベクターコンストラクトを作成し、ヒト・マウス細胞を用いてin vitro細胞系譜転換実験を行い、転換効率の観点から細胞系譜転換に最適な配列順を明らかとしたのち、実際に誘導された細胞の上皮細胞としての性質についての解析を開始した。
当該ポリシストロニック配列を搭載することが可能な大容量ウイルスベクター作成を目的としたバックボーンプラスミドコンストラクト作成を進めた。
臨床応用に耐えうる効率・安全性を目指して要素技術の開発を進める。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
3: やや遅れている
理由
当初予定していた研究開発項目のうち、皮膚皮下組織の間葉系細胞に特化した指向性を有するAAVの開発、複数のリプログラミング因子を同時に遺伝子導入するためのポリシストロニックベクター配列の最適化、については本質的な進展目標を達しつつあるため。
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| 今後の研究の推進方策 |
開発を進めてきた新規AAVカプシドについて、パッケージング効率・遺伝子導入効率の点で既存のAAVに比較して優れている可能性のあるデータが得られているため、定量的な評価を進める。
大容量AAVカプシドの開発については、当初予定通りの方針で実現可能性を見極めながら検討を進め、これまでに明らかとなった最適化配列で遺伝子導入実験を進めていく。
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