研究課題
ヒトiPS細胞の硬組織形成細胞分化誘導解析ヒトiPS細胞を培養皿で培養し、Embryoid bodiesを形成させた。その後、同細胞塊からOut-growthした間質様細胞を回収し、同細胞の拡大培養を続けることで、間葉系幹細胞様細胞とした。同細胞を硬組織形成細胞分化誘導(石灰化誘導)培地にて長期培養を行い、アルカリフォスファターゼ活性の測定、石灰化ノジュール形成の計測、細胞増殖解析を行った。さらに、ヒト歯根膜細胞、ヒト歯髄細胞を用いて硬組織形成細胞分化能の比較検討を行った。侵襲性歯周炎患者iPS細胞の樹立臨床研究に関する説明を行い、インフォームドコンセントを取得した後に、侵襲性歯周炎患者におけるスケーリング・ルートプレーニング処置に際して、キュレッタージ時に採取される肉芽組織を培養し、無菌的培養を行うことにより同組織より初代培養線維芽細胞を単離した。次に、同線維芽細胞にiPS誘導因子の遺伝子導入を行い、増殖してきた細胞を分離培養した結果、侵襲性歯周炎患者由来iPS細胞を樹立した。iPS細胞におけるエピジェネティック解析侵襲性歯周炎において、局所の炎症性歯周組織におけるエピジェネティック変化が、その発症や病態に関わっている可能性が考えられる。そこで、iPS細胞、ヒト歯根膜細胞、ヒト歯髄細胞に対して硬組織形成細胞分化誘導を行った際に、HDAC(ヒストン脱アセチル化酵素)阻害薬を添加し、ヒストンの脱アセチル化を抑制した時の硬組織形成細胞分化へ与える影響を、アルカリフォスファターゼ活性の測定、石灰化ノジュール形成の計測、細胞増殖解析にて比較検討した。
令和4年度が最終年度であるため、記入しない。
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