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2023 年度 実績報告書

微小気泡と音響放射力による細胞動態制御を応用した3次元多層管腔構造体の形成

研究課題

研究課題/領域番号 20H04547
研究機関東京農工大学

研究代表者

桝田 晃司  東京農工大学, 工学(系)研究科(研究院), 教授 (60283420)

研究分担者 宮本 義孝  国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 周産期病態研究部, 研究員 (20425705)
鈴木 亮  帝京大学, 薬学部, 教授 (90384784)
研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2024-03-31
キーワード音響放射力 / 血管内皮細胞 / タイムリバーサル法 / 時空間分割照射 / 人工血管
研究実績の概要

2022年度までは、血管内皮細胞と微小気泡の凝集体が音響放射力によって流路(断面が1mm程度の矩形)内壁に捕捉され、さらにそのままの状態で(in situ)インキュベータ内で培養されることを確認できたものの、そのために必要な最適条件を見つけるには至らなかった。2023年度は超音波捕捉条件、および細胞の培養条件について検討し、超音波により人工血管を作製するために必要な条件の導出を試みた。
これまでの超音波照射方法は、焦点サイズ3mm程度の集束超音波を流路内に形成、または流路内を移動させることで凝集体を捕捉していたが、そのような単純な照射方法ではなく、2次元アレイトランスデューサを用いた特殊な音場形成に取り組んだ。タイムリバーサル(時間軸反転)法と呼ばれる手法を導入し、通常の同心円状の超音波焦点ではなく、長方形の流路に合わせた長さ 10-20 mm、幅 3 mmの棒状音場を形成した。
中心周波数3 MHz、Duty比60 %のバースト波を条件とし、60秒間音波を照射し、捕捉した後に流れを止め、細胞の捕捉面積を算出した。その後捕捉された細胞を培養し、培養後の細胞総面積を算出した。様々な音場形状について検討した結果、単焦点や移動焦点の条件に比べて、同じ音響強度の条件では、棒状音場の方が捕捉細胞数、および培養開始後24時間後の細胞数に有意のある増殖は見られた。これから、音響強度の平均値を一定にした場合、音響強度の分布が広範囲でかつ低密度である方が、補足から培養の一連の過程に適していることが確認された。
さらに、平坦な流路内壁上に線維芽細胞(マウス3T3細胞)の基底膜を形成し、超音波により血管内皮細胞(ウシ由来)の凝集体を捕捉後、同様にin situ培養する異種細胞の多層共培養にも成功した。このように超音波で捕捉した細胞が異種細胞上で層を形成し、共培養が可能であることを確認した。

現在までの達成度 (段落)

令和5年度が最終年度であるため、記入しない。

今後の研究の推進方策

令和5年度が最終年度であるため、記入しない。

  • 研究成果

    (8件)

すべて 2024 2023

すべて 雑誌論文 (3件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (5件) (うち国際学会 3件)

  • [雑誌論文] Experimental conditions for efficient retention of vascular endothelial cells on channel wall using lipid bubbles and acoustic interference2024

    • 著者名/発表者名
      Ayako Noguchi, Shunya Watanabe, Kota Konishi, Narumi Ogawa, Yoshitaka Miyamoto, Daiki Omata, Ryo Suzuki, and Kohji Masuda
    • 雑誌名

      Jpn J. Applied Physics

      巻: 63 ページ: 04SP20

    • DOI

      10.35848/1347-4065/ad2f17

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Investigation of damage in vascular endothelial cells caused by lipid bubbles under ultrasound irradiation to verify the protective effect on cells2024

    • 著者名/発表者名
      Narumi Ogawa, Yoshiki Ito, Shunya Watanabe, Shinnosuke Araki, Naoya Yoshida, Kota Konishi, Ayako Noguchi, Yoshitaka Miyamoto, Daiki Omata, Ryo Suzuki, and Kohji Masuda
    • 雑誌名

      Jpn J. Applied Physics

      巻: 63 ページ: 04SP25

    • DOI

      10.35848/1347-4065/ad2c66

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Viability variation of T-cells under ultrasound exposure according to adhesion condition with bubbles2023

    • 著者名/発表者名
      Naoya Kajita, Yoshiki Ito, Shunya Watanabe, Yoshitaka Miyamoto, Daiki Omata, Kazuo Maruyama, Ryo Suzuki, and Kohji Masuda
    • 雑誌名

      J. Medical Ultrasonics,

      巻: 50 ページ: 121-129

    • DOI

      10.1007/s10396-022-01277-5

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] Experimental conditions for in situ culture of vascular endothelial cells retained to wall surface with microbubbles using acoustic radiation force2023

    • 著者名/発表者名
      Shunya Watanabe, Kota Konishi, Ayako Noguchi, Narumi Ogawa, Yoshitaka Miyamoto, Daiki Omata, Ryo Suzuki, and Kohji Masuda
    • 学会等名
      Ultrasound Electronics Symposium
    • 国際学会
  • [学会発表] Experimental conditions for efficient retention of vascular endothelial cells on channel wall using microbubbles and acoustic interference2023

    • 著者名/発表者名
      Ayako Noguchi, Shunya Watanabe, Kota Konishi, Narumi Ogawa, Yoshitaka Miyamoto, Daiki Omata, Ryo Suzuki, and Kohji Masuda
    • 学会等名
      Ultrasound Electronics Symposium
    • 国際学会
  • [学会発表] Comparison of damage in vascular endothelial cells on basement membrane according to surrounding microbubbles and irradiation direction of ultrasound2023

    • 著者名/発表者名
      Narumi Ogawa, Yoshiki Ito, Shunya Watanabe, Kota Konishi, Ayako Noguchi, Yoshitaka Miyamoto, Daiki Omata, Ryo Suzuki, Kohji Masuda
    • 学会等名
      Ultrasound Electronics Symposium
    • 国際学会
  • [学会発表] 超音波時空間分割照射による流路内細胞の捕捉制御パラメータの検討2023

    • 著者名/発表者名
      小西康太、渡部舜也、伊藤芳樹、宮本義孝、小俣大樹、鈴木亮、桝田晃司
    • 学会等名
      第 62 回日本生体医工学会大会
  • [学会発表] 微小気泡と音響放射力による血管内皮細胞の流路内捕捉および培養条件の検討2023

    • 著者名/発表者名
      野口彩子、渡部舜也、伊藤芳樹、宮本義孝、小俣大樹、鈴木亮、桝田晃司
    • 学会等名
      第 62 回日本生体医工学会大会

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公開日: 2024-12-25  

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