研究課題
本研究では、研究代表者が世界に誇るPLA2分子群の遺伝子改変マウス群にリピドミクスを展開し、各酵素が関わる疾患における責任脂質を同定するとともに、ヒト疾患との相関性を検証する。更に分子・細胞レベルでの各酵素の機能や調節機構と照合することで、PLA2分子群を起点とした疾患固有の脂質代謝マップの総合的体系化を目指す。1. 皮膚バリアの恒常性と疾患に関わる新規脂質経路：(1)PLA2G3はPGE2、PGF2aの産生を介して表皮バリアの恒常性に関わり、その破綻はアトピー性皮膚炎の増悪を引き起こすこと、(2)PLA2G2Fの一次産物であるリゾリン脂質P-LPEは皮膚において非酵素的に二次産物A-LPEに変換されること、(3) 乾癬で誘導されるPLA2G4Eは抗炎症性脂質NAEの産生に関わること、(4)強皮症において新規酵素ABHD12Bの発現が低下することを発見した。2. アレルギー疾患と関連するPLA2脂質経路：マスト細胞のPLA2G3が線維芽細胞のLPA1受容体を介してマスト細胞の成熟を、線維芽細胞PLA2G12Aがマスト細胞の活性化を促進することを見出し、その分子機構の解明に取り組んだ。3. 代謝・循環器疾患と関連するPLA2脂質経路：脂肪細胞ベージュ化に伴い発現誘導されるPLA2G2Eの機能を解析した。4. PLA2の新しい動作原理の解明：sPLA2の標的基質としての腸内細菌叢と細胞外小胞（EV）に着目した。小腸のPLA2G2Aが腸内細菌叢の変容を介して二次的に免疫や代謝に影響を及ぼすこと、リンパ腫組織に誘導されるPLA2G10がEVの修飾を介してリンパ腫増悪に関わることを発見した。さらに、生体膜新陳代謝の新基軸としてリン脂質カタボリズムに着目し、鍵分子であるPNPLA7とPNPLA8の全身欠損マウスが呈する共通の代謝障害について解析を行った。
3: やや遅れている
新型コロナウイルスの世界的流行により、マウス飼育の制限、職員学生の入室制限、世界的な物流の停滞による試薬・器具・マウス等の入手遅延が重なり、研究費の一部を次年度に繰り越すこととなった。特にコンディショナル欠損マウスを用いる一部の研究項目については、組織特異的Creマウスの購入に際して業者の都合から半年以上も納品を待たされた系統や、動物飼育室への入室制限のため一時的に大規模繁殖を控えざるをえなかった系統があり、欠損マウスの繁殖・解析計画の変更を余儀なくされた。マウスの繁殖が停滞している間に新しい備品の購入や新しい研究手法の導入に取り組んだことで、今後の研究の加速化が見込まれる。
1. 皮膚疾患と関連するPLA2脂質経路：前年度までの成果を継続展開するとともに、皮膚に固有に発現しているPLA2G4D、PLA2G4F、ABHD12Bの各欠損マウスの皮膚表現型の解析を実施する。ヒト皮膚疾患における各酵素の発現プロファイルを元に、PLA2G4Dについては乾癬、PLA2G4Fについては表皮修復、ABHD12Bについては強皮症に着目する。各欠損マウスの皮膚リピドミクスならびにリコンビナント酵素を用いた酵素活性評価系を展開し、各酵素が関わる脂質代謝を同定する。さらに、分担研究者と協力し、PLA2G2Fの二次産物A-LPEの生物活性の解明ならびに簡易検出法の開発を進める。2. アレルギー疾患と関連するPLA2脂質経路：前年度までの解析を継続し、マスト細胞のPLA2G3と線維芽細胞のLPA1受容体によるマスト細胞の成熟促進機構、線維芽細胞のPLA2G12Aによるマスト細胞の活性化増強機構を解明する。マスト細胞に加えて、PLA2G3欠損マウスでは好塩基球と好酸球、PLA2G12A欠損マウスではTh17細胞が乱れており、これらを精査する。3. 代謝・循環器疾患と関連するPLA2脂質経路： 脂肪細胞ベージュ化に伴い発現誘導されるPLA2G2Eの機能解析を継続するとともに、PLA2G2Fの膵β細胞における発現を検証する。更に、動脈硬化で誘導されるPLA2G3と病態の関わりについて、全身性及び細胞特異的（マクロファージ、血管内皮細胞）欠損マウスを用いて解析する。4. PLA2の新しい動作原理の解明：sPLA2による腸内細菌叢の変容ならびに細胞外小胞の修飾について、現象の普遍化を目指す。更に、リゾホスホリパーゼPNPLA6, PNPLA7の組織特異的欠損マウスを用い、肝臓、筋肉、神経、網膜等における各酵素の役割を解析する。
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すべて 国際共同研究 (2件) 雑誌論文 (6件) (うち国際共著 1件、 査読あり 5件、 オープンアクセス 4件) 学会発表 (8件) (うち招待講演 3件) 備考 (1件) 産業財産権 (2件)
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http://lmmhs.m.u-tokyo.ac.jp/
