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2021 年度 実施状況報告書

地上部の窒素栄養状態を根に伝達する長距離シグナルの解明

研究課題

研究課題/領域番号 20K05771
研究機関島根大学

研究代表者

蜂谷 卓士  島根大学, 学術研究院農生命科学系, 助教 (80709311)

研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2023-03-31
キーワード長距離シグナル / 窒素充足応答
研究実績の概要

本年度はシグナル候補の一つであるサイトカイニンについて解析を進めた。まず、野生株(WT)、サイトカイニン合成酵素欠損株(ipt3)、サイトカイニン合成酵素三重欠損株(ipt357)、硝酸還元酵素二重欠損株(NR-null)、硝酸還元酵素サイトカイニン合成酵素三重欠損株(ipt3 NR-null)を用いて、WT/ ipt357、ipt3/ipt357、NR-null/ipt357、ipt3 NR-null/ipt357(穂木/台木)の4種類の接ぎ木植物を作成した。次に、昨年度構築した非破壊的栄養操作系を用いて、これらの植物に硝酸イオンを蓄積させた後、窒素欠乏条件で栽培し、地上部と根を回収して分析に用いた。WT/ipt357、ipt3/ipt357と比べてNR-null/ipt357とipt3 NR-null/ipt357の地上部では硝酸イオン濃度が高かった。一方、全ての接ぎ木植物の根で硝酸イオン濃度は低かった。また、WT/ipt357と比べてNR-null/ipt357の地上部でIPT3の遺伝子発現レベルが高かった。接ぎ木植物の栽培栄養条件を操作することによって、地上部の硝酸イオンの蓄積レベルとサイトカイニン合成酵素の発現レベルを制御することができた。
次にWTとサイトカイニン受容体二重欠損株(ahk2,3)の接ぎ木植物(WT/WTとWT/ahk2,3)を窒素十分条件で栽培し、根におけるサイトカイニンの受容が成長、遺伝子発現、サイトカイニン濃度に与える影響を調べた。その結果、WT/WTと比べてWT/ahk2,3では、根におけるサイトカイニン合成酵素と分解酵素の遺伝子発現がそれぞれ誘導、抑制され、根と地上部におけるサイトカイニン濃度が増加し、地上部の成長が促進された。地上部から根へのサイトカイニンシグナルの伝達が根だけでなく地上部の応答も引き起こす可能性が示唆された。

現在までの達成度 (区分)
現在までの達成度 (区分)

2: おおむね順調に進展している

理由

野生株、サイトカイニン合成酵素欠損株、硝酸還元酵素二重欠損株、硝酸還元酵素サイトカイニン合成酵素三重欠損株と、サイトカイニン合成酵素三重欠損株の間の接ぎ木に成功した。さらに接ぎ木植物の栽培栄養条件を操作することによって、地上部の硝酸イオンの蓄積レベル(内的な窒素栄養状態)とサイトカイニン合成酵素の発現レベルを制御することができた。「根特異的なサイトカイニン受容の欠損が地上部の成長を促進する」現象を見出し、それに関する解析成果を査読付き国際学術誌に公表することができた。

今後の研究の推進方策

硝酸イオンの蓄積した地上部で誘導されたIPT3が、地上部と根のサイトカイニン分子種の濃度に与える影響を解析するために、4種類の接ぎ木植物の地上部と根のホルモノーム解析を進める(すでに3回独立の接ぎ木実験からのサンプルを回収済)。篩管液のサイトカイニン分子種の濃度についても解析を進める。また、地上部で誘導されたIPT3が、地上部と根のトランスクリプトームに与える影響を解析するためにRNA-Seq解析も進める(すでに3回独立の接ぎ木実験からのサンプルのcDNAライブラリを調製済)。特に重要な遺伝子については定量PCRとウエスタンブロットによる発現解析もあわせて実施する。また、ProIPT3:GFPを導入したWTとNR-nullを用いて、地上部に硝酸イオンが蓄積したときにIPT3がどこで誘導されるのかを解析する。TCS:GFP(サイトカイニン応答エレメント:レポーター)を導入したWTとNR-nullを用いて、地上部に硝酸イオンが蓄積したときにサイトカイニン応答がどこで誘導されるのかについても精査する。

  • 研究成果

    (9件)

すべて 2022 2021

すべて 雑誌論文 (5件) (うち国際共著 2件、 査読あり 5件、 オープンアクセス 3件) 学会発表 (4件) (うち招待講演 2件)

  • [雑誌論文] Regulation of ammonium acquisition and use in <i>Oryza longistaminata</i> ramets under nitrogen source heterogeneity2022

    • 著者名/発表者名
      Kawai Misato、Tabata Ryo、Ohashi Miwa、Honda Haruno、Kamiya Takehiro、Kojima Mikiko、Takebayashi Yumiko、Oishi Shunsuke、Okamoto Satoru、Hachiya Takushi、Sakakibara Hitoshi
    • 雑誌名

      Plant Physiology

      巻: 188 ページ: 2364~2376

    • DOI

      10.1093/plphys/kiac025

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Expression analysis of plant intracellular Ras-group related leucine-rich repeat proteins (PIRLs) in Arabidopsis thaliana2022

    • 著者名/発表者名
      Hossain Md. Firose、Sultana Mst Momtaz、Tanaka Ai、Dutta Amit Kumar、Hachiya Takushi、Nakagawa Tsuyoshi
    • 雑誌名

      Biochemistry and Biophysics Reports

      巻: 30 ページ: 101241~101241

    • DOI

      10.1016/j.bbrep.2022.101241

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Root-specific Reduction of Cytokinin Perception Enhances Shoot Growth in <i>Arabidopsis thaliana</i>2022

    • 著者名/発表者名
      Monden Kota、Kojima Mikiko、Takebayashi Yumiko、Suzuki Takamasa、Nakagawa Tsuyoshi、Sakakibara Hitoshi、Hachiya Takushi
    • 雑誌名

      Plant and Cell Physiology

      巻: 63 ページ: 484~493

    • DOI

      10.1093/pcp/pcac013

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Excessive ammonium assimilation by plastidic glutamine synthetase causes ammonium toxicity in Arabidopsis thaliana2021

    • 著者名/発表者名
      Hachiya Takushi、Inaba Jun、Wakazaki Mayumi、Sato Mayuko、Toyooka Kiminori、Miyagi Atsuko、Kawai-Yamada Maki、Sugiura Daisuke、Nakagawa Tsuyoshi、Kiba Takatoshi、Gojon Alain、Sakakibara Hitoshi
    • 雑誌名

      Nature Communications

      巻: 12 ページ: 4944

    • DOI

      10.1038/s41467-021-25238-7

    • 査読あり / オープンアクセス / 国際共著
  • [雑誌論文] Nitrogen Nutrition Promotes Rhizome Bud Outgrowth via Regulation of Cytokinin Biosynthesis Genes and an Oryza longistaminata Ortholog of FINE CULM 12021

    • 著者名/発表者名
      Shibasaki Kyohei、Takebayashi Arika、Makita Nobue、Kojima Mikiko、Takebayashi Yumiko、Kawai Misato、Hachiya Takushi、Sakakibara Hitoshi
    • 雑誌名

      Frontiers in Plant Science

      巻: 12 ページ: 670101

    • DOI

      10.3389/fpls.2021.670101

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [学会発表] 操作実験とオミクス解析による植物の栄養応答の研究2022

    • 著者名/発表者名
      蜂谷卓士
    • 学会等名
      令和3年度生物資源科学部研究セミナー(第41回
    • 招待講演
  • [学会発表] 硝酸還元と呼吸鎖の相互作用に関する解析2021

    • 著者名/発表者名
      蜂谷卓士
    • 学会等名
      植物の栄養研究会 第 6 回交流会 2021年11月13日
    • 招待講演
  • [学会発表] A cellophane-supported Arabidopsis culture for seamless transfer between different media is useful for analyzing various nitrogen responses2021

    • 著者名/発表者名
      蜂谷卓士, 大屋卓博, 門田宏太, 永江杏実, 中川 強
    • 学会等名
      日本土壌肥料学会2021年度北海道大会 2021年9月14日
  • [学会発表] 根特異的なサイトカイニン受容の低下が地上部のトランスゼアチン型サイトカイニンとバイオマス を増加させる2021

    • 著者名/発表者名
      門田宏太, 小嶋美紀子, 竹林裕美子, 鈴木孝征, 中川強, 榊原均, 蜂谷卓士
    • 学会等名
      日本植物学会 第85回大会 2021年9月18日

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公開日: 2022-12-28  

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