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アニサキス種鑑別を目的とした、マルチプレックスリアルタイムPCR試験系（1本の反応チューブでヒト寄生主要3種の鑑別）の開発とその有効性を検討した。
アニサキスミトコンドリアDNAのチトクロームオキシダーゼサブユニット1遺伝子（cox1）の塩基配列情報を基に、ヒト寄生主要3種各々への特異反応が予想されるプライマーとプローブを設計した。主要3種のDNAならびにその遺伝子組換え体プラスミドを陽性対照として試験したところ、Anisakis simplex sensu stricto、A. pegreffiiは各々に特異な試薬のみで増幅反応が認められ、A. berlandiはその種に特異な試薬とA. simplex sensu strictoの試薬で増幅反応を認めた。各試薬に対する増幅反応のパターンから、これら3種の鑑別が可能であった。以上から、臨床例または鮮魚介類より検出されたアニサキスのうち、ヒト寄生主要3種の鑑別に、今回開発したマルチプレックスリアルタイムPCR法は有用と考えられた。
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