研究課題
本研究ではBウイルスの外套糖タンパク質を被った水疱性口炎ウイルス(VSV)シュードタイプ(BV/VSVシュードタイプ)を新規に作製し、ウイルスそのものを用いずにBウイルス感染を検出する系を開発し、Bウイルスに対する中和抗体を特異的に検出可能とすることを目的とする。また、外套糖タンパク質に対するモノクローナル抗体を作製し、競合ELISAによりBウイルス特異的抗体検出法の構築を試みる。令和4年度までの研究で、Bウイルス外套糖タンパク質発現哺乳細胞発現ベクターを至適化することによって、Vero細胞等へ感染性のあるBV/VSVシュードタイプの作出が可能となった。令和5年度はBV/VSVシュードタイプの感染が外套糖タンパク質の一種であるgDと細胞受容体nectin-1依存的であることが確認された。さらに、BV/VSVシュードタイプのヒト神経芽腫由来IMR32細胞への高い感染性も確認された。これらの結果から、BV/VSVシュードタイプを用いることにより、Bウイルスの神経由来細胞への感染性の解析が可能であると考えられた。また、BV/VSVシュードタイプを用いて日本の野外で採取されたサル血清からBウイルス中和抗体をハイスループットに検出可能であった。ヒトのBウイルス抗体を検出するためには単純ヘルペスウイルスとの抗原交差性を考慮する必要があり、さらなる検討が必要である。また、外套糖タンパク質に対するモノクローナル抗体はBウイルスに特異的であることが示された。
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