| 研究課題/領域番号 |
20K07073
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| 研究機関 | 奈良県立医科大学 |
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研究代表者 |
吉栖 正典 奈良県立医科大学, 医学部, 教授 (60294667)
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| 研究分担者 |
京谷 陽司 奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (10706534)
趙 晶 奈良県立医科大学, 医学部, 助教 (60804466)
中平 毅一 奈良県立医科大学, 医学部, 准教授 (80844414)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 動脈解離 / 伸展負荷 / 血管平滑筋細胞死 / MAPキナーゼ / Nr4a |
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| 研究実績の概要 |
本研究は、１）急激な伸展負荷による血管平滑筋細胞死の分子メカニズムに関わるNr4aの役割解明と、２）Nr4aをターゲットとした、降圧に依存しない全く新しい大動脈解離の発症予防薬の開発を目的とする。昨年度はin vitroでの実験で、伸展負荷による血管平滑筋細胞死に対して、Nr4aが防御的に作用していることを見出した。今年度は生体内情報伝達機構の観点からNr4aの制御機序を究明するために、腹部大動脈縮窄(Abdominal Aortic Constriction、AAC)による大動脈瘤モデルマウスを用いて更なる実験を展開した。
①AACによる高血圧により、4時間後にNr4aの遺伝子発現が増加することを確認した。
②ウェスタンブロッティングによるNr4aタンパク質発現を経時的に定量し、AAC 9時間後にNr4aのタンパク質発現が増加傾向を示した。有意差を検定するために、今後さらに動物数を増やして確認する。
③さらに、NR4A1の特異的阻害薬やshRNAレンチウイルスを導入した遺伝子発現阻害法を用いて、核内受容体であるNr4aが転写因子としてAACによる血管平滑筋細胞死に関わるか否かを免疫蛍光染色実験で確認する予定である。AACモデルマウスにおけるNr4aの制御分子をスクリーニングし、動脈解離発症のNr4aによる制御機序を検討する。
以上の結果より、今年度の実験計画は概ね順調に展開していると考えている。研究が進展すれば、降圧効果に依存しない全く新しい大動脈解離の発症予防薬の開発に道が開かれると確信している。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究は、１）急激な伸展負荷による血管平滑筋細胞死の分子メカニズムに関わるNr4aの役割解明と、２）Nr4aをターゲットとした、降圧に依存しない全く新しい大動脈解離の発症予防薬の開発を目的としている。この２つの目的のために3年間の研究期間を設定したが、今年度は上記①、②に該当する腹部大動脈縮窄(Abdominal Aortic Constriction、AAC)による大動脈瘤モデルマウスを用いて、Nr4a遺伝子とタンパク質の発現上昇を確認した。得られた実験結果は妥当であり、おおむね順調に進展していると判断した。
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| 今後の研究の推進方策 |
本研究は、１）急激な伸展負荷による血管平滑筋細胞死の分子メカニズムに関わるNr4aの役割解明と、２）Nr4aをターゲットとした、降圧に依存しない全く新しい大動脈解離の発症予防薬の開発を目的としている。次年度は、上記③に該当するNR4A1の特異的阻害薬やshRNAレンチウイルスを導入した遺伝子発現阻害法を用いて、核内受容体であるNr4aが転写因子としてAACによる血管平滑筋細胞死に関わるか否かを免疫蛍光染色実験で確認する予定である。伸展負荷による血管平滑筋細胞死に関わるNr4aの役割を解明できれば、降圧効果に依存しない全く新しい大動脈解離の発症予防薬の開発に取り組んでいく。
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