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本申請の研究目的は、シスプラチン耐性獲得機構にミトコンドリア機能低下が関わっているか明らかにするものであり、さらにミトコンドリアに集積しやすい光感受性物質を用いた光線力学療法（PDT）がシスプラチンに耐性を示すがんに対して有効な治療法になるか明らかにすることである。昨年度は、シスプラチン耐性細胞では、ミトコンドリアDNA変異によるミトコンドリア機能低下が過剰な活性酸素を産生させ、これにより抗アポトーシスタンパク質の発現が誘導され、シスプラチンで誘導されるアポトーシスに対して耐性を示すことを報告した。またミトコンドリアに集積しやすい光感受性物質として、ミトコンドリアで光感受性物質であるプロトポルフィリンIX（PpIX）に変換される5-アミノレブリン酸（5-ALA）を用い、PDTがシスプラチンに耐性を示すがん細胞に有効であるか検討した。シスプラチン耐性細胞では、PpIX細胞内蓄積が増加し、5-ALA-PDTによる殺細胞効果も増強していた。そこで、本年度はシスプラチンに耐性を示すがんに対する5-ALA-PDTの有効性をin vivoでも評価するために、シスプラチン耐性担癌マウスの作出を試みた。SCIDマウスにヒト肺がん由来A549細胞とA549細胞から樹立したシスプラチン耐性細胞を皮下移植した。腫瘍の体積が100 mm3以上になってから2 mg/kgのシスプラチンまたは生理食塩水を１週間に3回腹腔内投与し、ノギスを用いて経時的に腫瘍体積を測定した。A549細胞を移植したマウスでは、シスプラチンによる抗腫瘍効果を観察することができたが、シスプラチン耐性細胞を移植したマウスでは、シスプラチンによる抗腫瘍効果は観察されなかったことから、シスプラチン耐性細胞を移植したマウスをシスプラチン耐性担癌マウスとして、今後、in vivoの実験に使用する予定である。
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