| 研究課題/領域番号 |
20K07173
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| 研究機関 | 帝京大学 |
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研究代表者 |
久保 義行 帝京大学, 薬学部, 准教授 (20377427)
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| 研究分担者 |
細谷 健一 富山大学, 学術研究部薬学・和漢系, 教授 (70301033)
赤沼 伸乙 富山大学, 学術研究部薬学・和漢系, 准教授 (30467089)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 血液精巣関門 / 栄養物輸送 / 薬物輸送 / HIV |
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| 研究実績の概要 |
精巣では、精子形成などの生理的イベントに加え、胚細胞腫瘍（精巣腫瘍）やヒト免疫不全ウイルス（HIV）などの感染症、男性不妊、精巣毒性といった病態が知られる。これらの原因究明や薬物療法の向上には、血液精巣関門の輸送機構に関する知見が有用と考えられ、特にインフラックス輸送機構の把握とその分子機序解明が必須となる。本研究課題では、血液精巣関門に存在するインフラックス輸送機構に着目して、1) 薬物・栄養物輸送機構の探索、2) 機能特性の解明、3) 分子実体の同定、4) 個体での発現と役割、を検証・解明し、血液精巣関門インフラックス輸送機構の薬物送達への応用に向けた基盤を構築することを目的とした。これまでのin vivoレベル解析によって、血液精巣関門に栄養物や毒物、薬物を輸送基質として認識するインフラックス輸送機構の存在が示されたことから、令和３年度は、これら化合物に着目して、「2) 機能特性の解明」および「3) 分子実体の同定」、「4) 個体での発現と役割解明」を実施した。マウスセルトリ細胞由来TM４細胞などのin vitroモデル細胞解析系において、taurineやnicotine、zidovudineの輸送機能特性を詳細に解析するとともに、ノックダウン解析などの活用によって血液精巣関門におけるtaurine輸送にタウリントランスポーター（TAUT/SLC6A6）の寄与を明らかとするとともに、その発現と局在をウエスタンブロット解析および免疫組織学的解析手法によって明らかとした。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
本研究では、血液精巣関門に存在するインフラックス輸送機構に着目して、1) 薬物・栄養物輸送機構の探索、2) 機能特性の解明、3) 分子実体の同定、4) 個体での発現と役割、を検証・解明し、血液精巣関門インフラックス輸送機構の薬物送達への応用に向けた基盤を構築することを目的としている。令和3年度は、種々検討の結果、血液精巣関門モデル細胞を用いたin vitro解析手法の有用性を示すとともに、これを用いた輸送機能特性の検証では、複数の化合物のインフラックス輸送特性を明らかとできた。加えて、ノックダウン解析による分子実体の同定、および発現・局在解析においても成果が得られている。
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| 今後の研究の推進方策 |
令和3年度までに、血液精巣関門を介したインフラックス輸送機構の研究に有用なin vivoおよびin vitro解析が明らかとなった。既にtaurineに関しては十分な成果が得られていることから、次年度はcholineやnicotine、zidovudineなどのインフラックス輸送機構に関して、「3) 分子実体の同定」、「4) 個体での発現と役割解明」を実施してゆく予定である。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
令和３年度では、in vitro解析系や発現局在解析系の検討に多数の試薬や時間を要すると想定していたが、最適条件が比較的効率的に見出された。また、申請当初に参加を予定していた国内外の学会がオンライン開催や中止となったことから、研究費の次年度使用が生じた。これに関しては、令和4年度に実施予定の解析に使用する試薬類の購入に充てる予定である。
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