| 研究課題/領域番号 |
20K07233
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| 研究機関 | 東京医科大学 |
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研究代表者 |
篠原 広志 東京医科大学, 医学部, 講師 (10455793)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 子宮内電気穿孔法 / 海馬歯状回 / ニューロン新生 / 神経幹細胞 / 顆粒細胞 |
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| 研究実績の概要 |
記憶・学習に重要な海馬の歯状回では、成体期までニューロンの新生が継続する特徴がある。しかしながらこの成体期ニューロン新生がいつ・どこから産まれた神経幹細胞によってもたらされるかは不明である。この神経幹細胞の所在を調べるべく、その誕生地として予想される海馬背側部および腹側部を子宮内電気穿孔法によって同時に標識した。この方法により、いずれの領域由来の神経幹細胞が成体期ニューロン新生に寄与しているかを調べることにした。
この際、背側および腹側の神経幹細胞を区別して標識するために、それぞれの領域に発現が特異的な分子のプロモーターを用いることにした。背側領域の標識はPB-Hopx-RFP、一方で腹側領域の標識はPB-Gli-GFPをそれぞれ設計・作製した。
さらに海馬の歯状回の形成発生機構を解明するために、マイクロアレイ解析やシングルセル解析により、海馬領域特異的に発現が認められる分子を複数見いだした。現在はこれらの分子のプロモーター制御下で蛍光タンパク質が発現するコンストラクトを作製し、子宮内電気穿孔法を用いて、海馬歯状回形成や神経新生に寄与する細胞の多様性を分類して理解する研究も進めている。
具体的には、我々はすでに発生中の海馬歯状回での細胞移動において、移動経路や形態・運命が異なる様々な細胞の種類があることをスライス培養しタイムラプス解析によって見いだしている。上記のように分子によって識別される細胞画分が、どの細胞種と対応するかについて解析を進めている。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
4: 遅れている
理由
コロナ禍による余波はいまだ残っているが昨年度までの頃よりは、研究を行える環境が戻りつつある。しかしながら以前の遅れが取り戻せていない状況である。
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| 今後の研究の推進方策 |
子宮内電気穿孔法を行う環境は整ってきたので、未着手の実験データを行いつつ、すでに得られたデータの解析・編集を進めて、その研究成果を学会や論文において発表する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
予定していた動物実験などが期間内に終了出来なかった関係で、十分なデータを得るために期間を延長した。よって、未実行の実験用や論文投稿費用などの予算が次年度使用額として残った。
次年度は予定している実験を行い、解析し、論文投稿する。これらの費用として次年度使用額を使用する計画である。
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