| 研究課題/領域番号 |
20K07235
|
|---|
| 研究機関 | 福岡大学 |
|---|
研究代表者 |
土井 佳子 福岡大学, 医学部, 講師 (10341538)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
|
| キーワード | 赤血球 |
|---|
| 研究実績の概要 |
自己免疫性甲状腺疾患（AITD）感受性遺伝子として同定したZFAT(zinc-finger gene in AITD susceptibility region / zinc-finger with AT-hook) のマウス骨髄での赤血球分化における機能的役割の解明とその機能発現のための分子機構の同定を目指して、マウス骨髄由来赤血球系前駆細胞を中心にZFATの機能解析を進めた。
タモキシフェン投与による時期特異的にZFATを欠失したコンディショナルZFAT欠失マウスの表現型解析により、骨髄由来赤血球系前駆細胞において細胞数の減少が示され、赤血球分化過程での機能が示唆された。骨髄由来赤血球系前駆細胞を対象にChIP(クロマチン免疫沈降)-seq解析によるZFATゲノム結合領域の同定を試みた。C57BL/6マウス骨髄由来の赤血球系前駆細胞をセルソーターにより分離し、樹立した抗ZFAT抗体を用いて、ChIP-seq解析を行った。取得したデータの解析からZFATのゲノム結合領域の同定を試みている。また、酪酸ナトリウムによるヒト慢性骨髄性白血病細胞K562細胞の赤芽球系細胞への分化誘導を行い、分化誘導過程でのZFATの発現変動および連動した発現変動分子を検討した。発現変動候補分子として数種類の分子の発現量を解析した。引き続き発現変動分子の解析とその連動した発現がZFATと直接的に関与するかどうかの検討を進める。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
C57BL/6マウスの骨髄から割合の少ない赤血球系前駆細胞を分離するために、マウスの匹数とセルソーターでの分離の回数を増やすことで回収するのに期間を要したが、予定していた計画である骨髄由来赤芽球系前駆細胞を分離後、ChIP-seq解析によりZFATゲノム結合領域の解析を進めることができた。
|
| 今後の研究の推進方策 |
マウス骨髄由来赤血球系前駆細胞におけるZFATの機能解析および機能発現のための分子機構の同定を目指して、ZFATを欠失させたときの赤血球分化段階におけるフローサイトメトリー解析等による表現型解析、さらにZFAT欠失による網羅的な発現変動遺伝子の発現プロファイル取得のためのRNA-seq解析および定量PCRによる発現変動遺伝子の検討を行う。また、K562細胞のZFAT発現抑制時において酪酸ナトリウムによる赤芽球系細胞への分化誘導を行い、ZFATに関連した分化過程の分子メカニズムの同定を試みる。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
新型コロナウイルス感染症緊急事態宣言等により、物品費および旅費の支出が予定より減少したため、次年度以降の計画内容に追加して使用することを予定している。
|
