| 研究課題/領域番号 |
20K07308
|
|---|
| 研究機関 | 浜松医科大学 |
|---|
研究代表者 |
丹伊田 浩行 浜松医科大学, 医学部, 准教授 (20336671)
|
|---|
| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
|
| キーワード | telomerase / XPF / TRF2 / NER / telomere |
|---|
| 研究実績の概要 |
紫外線照射により生じるピリミヂン二量体の修復活性に必要な分子の道程を目的とし、ピリミヂン二量体特異的抗体を用いた免疫染色を手法として関連分子siRNAによるのスクリーニングを行なった。その中で特に阻害活性が高い影響を与えたものはTERTをはじめとするtelomeraseサブユニットであった。telomeraseを構成する各サブユニットの欠損により紫外線照射後のグローバルゲノム-ヌクレオチド除去修復（GG-NER)の進行に遅延が認められた。このゲノム全体のNERの欠損はtelomere領域に生じたピリミヂン二量体の除去修復が行われないために引き起こされていることが示唆された。telomereに生じたピリミヂン二量体の除去修復はtelomerase活性をもたない正常ヒト繊維芽細胞では行われず、telomerase活性を発現するHeLa細胞などガン細胞株では行われるらしいことが明らかになっている。我々はHeLa細胞を用いてtelomeraseとNERをリンクするような分子を検討した。その結果、telomerase欠損時にNER進行に関与する分子を探索するとNERのコア因子である構造特異的エンドヌクレアーゼXPFが関与していることが明らかとなった。XPFはtelomere repeat二本鎖結合タンパクであるTRF2と結合することが以前報告されている。XPFによりDNAが切断されるとこの修復機構は後戻りをすることができない、クリティカルなステップであるためXPFの活性制御は厳密に行われる必要がある。XPFはTRF2と結合することによりtelomereに局在するためtelomerase欠損時にその活性制御が失われてしまうことが予想される。今後telomeraseとXPFの結合の可能性やtelomerase欠損時の紫外線照射によるtelomere維持についてXPFの活性制御とともに検討を進めて行く。
|
| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
telomereとピリミヂン二量体除去修復をリンクさせるNERコア因子XPFの活性制御について検討を始めることができ概ね順調に研究は進行している。
|
| 今後の研究の推進方策 |
構造特異的エンドヌクレアーゼXPFの活性は厳密に制御される必要がある。この仕組みを明らかにすることが今後の課題と考えている。
|
| 次年度使用額が生じた理由 |
コロナ禍により当初予定していた海外出張を延期したこととラジオアイソトープを用いたtelomere解析を翌年度行うことにしたため次年度使用額が生じた。
|
