胆管癌の抗癌剤治療抵抗性に関わる候補分子Clusterinの機能解析と治療応用

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20K07394
• 研究機関: 大分大学
• 研究代表者: 村上 和成 大分大学, 医学部, 教授 (00239485)
• 研究分担者: 守山 正胤 大分大学, 医学部, 客員研究員 (90239707) ; 泥谷 直樹 大分大学, 医学部, 准教授 (80305036) ; 兒玉 雅明 大分大学, 福祉健康科学部, 教授 (20332893) ; 沖本 忠義 大分大学, 医学部, 准教授 (90381037) [辞退]
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: clusterin / 抗がん剤抵抗性 / オルガノイド / 胆汁

研究実績の概要

難治性消化器癌である胆管癌の治療成績を改善するためには、治療抵抗性に関わる分子メカニズムを明らかにすることが必要である。私たちはこれまでに膵癌の治療抵抗性に関わる分子としてClusterin (CLU)を同定した。本研究は、膵癌同様に難治癌である胆管癌におけるCLUの発現動態を調べて、その機能的意義を解明し、動物移植モデルを用いて標的治療法の可能性を検討するものである。これまで胆管癌細胞株を研究対象としてきたが、入手可能な細胞株が限定的であるため、一昨年度から生体試料由来の組織培養系の樹立を開始した。
本研究期間中に68症例の胆管癌患者から胆汁を採取して、胆汁由来胆管癌オルガノイドの樹立を試みた。うち60症例でオルガノイド樹立に成功した。８例の不成功例はいずれも胆管にステントが留置された症例であり、胆管炎合併に伴う細菌のコンタミネーションが原因であった。成功例のうち40例については樹立したオルガノイドを免疫不全マウスに移植して腫瘍形成能と浸潤・転移能、癌悪液質の有無等について調べたところ、16例の胆汁由来オルガノイドにおいて移植したマウスで腫瘤形成を認めた。うち5例では病理学的解析により明らかな胆管癌であることが確認できた。
また、移植前後のオルガノイドからゲノムDNAを抽出して、いくつかのがん関連遺伝子についてターゲットシークエンスを施行した。Kras遺伝子やTP53遺伝子の検索から、移植後のオルガノイドではそれらの遺伝子の機能的変異を有する癌細胞の割合が顕著に増えていることを確認した。この結果は、胆汁由来オルガノイドには癌および正常胆管上皮由来のオルガノイドが混在することを示している。われわれは癌オルガノイドを濃縮する方法として、免疫不全マウスへの移植や、長期の継代培養、あるいはp53変異を有する症例についてはMDM2阻害剤の添加が有用であることを示した。

研究成果

• [雑誌論文] Efficient Establishment of Bile-Derived Organoids From Patients With Biliary Cancer (2023)
  • 著者名/発表者名: Kinoshita K、Tsukamoto Y、Hirashita Y、Fuchino T、Kurogi S、Uchida T、Nakada C、Matsumoto T、Okamoto K、Motomura M、Fukuchi S、Sagami R、Nagai T、Gotoh Y、Fukuda K、Ogawa、Mizukami K、Okimoto T、Kodama M、Murakami K、Moriyama M、Hijiya N
  • 雑誌名: Laboratory Investigation 巻: 103 ページ: 100105～100105
  • DOI: 10.1016/j.labinv.2023.100105
  • 査読あり
• [雑誌論文] Involvement of clusterin expression in the refractory response of pancreatic cancer cells to a MEK inhibitor (2023)
  • 著者名/発表者名: Amada K、Hijiya N、Ikarimoto S、Yanagihara K、Hanada T、Hidano S、Kurogi S、Tsukamoto Y、Nakada C、Kinoshita K、Hirashita Y、Uchida T、Shin T、Yada K、Hirashita T、Kobayashi T、Murakami K、Inomata M、Shirao K、Aoki M、Takekawa M、Moriyama M
  • 雑誌名: Cancer Science 巻: Jan 24 online ページ: -
  • DOI: 10.1111/cas.15735
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Kyoto international consensus report on anatomy, pathophysiology and clinical significance of the gastro-oesophageal junction (2022)
  • 著者名/発表者名: Sugano K, Stuart J Spechler, Emad M El-Omar, Kenneth E L McColl,Takubo K, Gotoda T, Fujishiro M, Iijima K, Inoue H, Kawai T, Kinoshita Y, Miwa H, Mukaisho K, Murakami K, Seto Y, Tajiri H, Bhatia S,Myung-Gyu Choi, Rebecca C Fitzgerald,Kwong Ming Fock, Khean-Lee Goh, Peter Malfertheiner etc.
  • 雑誌名: Gut 巻: 71(8) ページ: 1488-1514
  • DOI: 10.1136/gutjnl-2022-327281
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Diagnostic Strategy of Early Stage Pancreatic Cancer via Clinical Predictor Assessment: Clinical Indicators, Risk Factors and Imaging Findings (2022)
  • 著者名/発表者名: Sagami R、Hayasaka K、Ujihara T、Iwaki T、Katsuyama Y、Harada H、Tsuji H、Sato T、Nishikiori H、Murakami K、Amano Y
  • 雑誌名: Diagnostics 巻: 12 ページ: 377～377
  • DOI: 10.3390/diagnostics12020377
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] COVID-19 vaccination and liver disease (2022)
  • 著者名/発表者名: Ozaka S、Kobayashi T、Mizukami K、Murakami K
  • 雑誌名: World Journal of Gastroenterology 巻: 28 ページ: 6791～6810
  • DOI: 10.3748/wjg.v28.i48.6791
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Changes in Gastric Mucosal Glycosylation Before and After Helicobacter pylori Eradication Using Lectin Microarray Analysis (2022)
  • 著者名/発表者名: Ogawa R、Okimoto T、Kodama M、Togo K、Fukuda K、Okamoto K、Mizukami K、Murakami K
  • 雑誌名: The Turkish Journal of Gastroenterology 巻: 33 ページ: 88～94
  • DOI: 10.5152/tjg.2021.201116
  • 査読あり / オープンアクセス
• [雑誌論文] Enhanced phosphorylation of c-Jun by cisplatin treatment as a potential predictive biomarker for cisplatin response in combination with patient-derived tumor organoids (2022)
  • 著者名/発表者名: Tsukamoto Y、Kurogi S、Shibata T、Suzuki K、Hirashita Y、Fumoto S、Yano S、Yanagihara K、Nakada C、Mieno F、Kinoshita K、Fuchino T、Mizukami K、Ueda Y、Etoh T、Uchida T、Hanada T、Takekawa M、Daa T、Shirao K、Hironaka S、Murakami K、Inomata M、Hijiya N、Moriyama M
  • 雑誌名: Laboratory Investigation 巻: 102 ページ: 1355～1366
  • DOI: 10.1038/s41374-022-00827-2
  • 査読あり
• [学会発表] ピロリ除菌後胃癌、未感染胃癌の問題点と研究 (2022)
  • 著者名/発表者名: 村上 和成
  • 学会等名: GI Week2022 日本消化管学会
• [学会発表] H. pyloriと胃炎と胃癌 (2022)
  • 著者名/発表者名: 村上 和成
  • 学会等名: JDDW 2022 第30回日本消化器関連学会週間