| 研究課題/領域番号 |
20K07536
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| 研究機関 | 福井大学 |
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研究代表者 |
竹内 健司 福井大学, 学術研究院医学系部門, 助教 (40236419)
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| 研究分担者 |
千原 一泰 福井大学, 学術研究院医学系部門, 准教授 (00314948)
定 清直 福井大学, 学術研究院医学系部門, 教授 (10273765)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2024-03-31
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| キーワード | 二重鎖RNA / ウイルス感染 / 抗ウイルス応答 |
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| 研究実績の概要 |
我々の体には侵入した病原ウイルスを検知しこれを排除する仕組みが備わっている。ウイルス感染を疑わせる第一級の証拠は二重鎖RNAである。これが体内で検出されると様々な抗ウイルス応答が起こることが判っている。ただし、個体にとって抗ウイルス応答が起こっている状態は、発熱や倦怠感などのつらい症状を伴うものであり、いわば非常事態である。個体がウイルス排除に成功すれば、速やかに抗ウイルス応答を終息させ、通常の状態へと戻す必要がある。しかし、抗ウイルス応答を終息させることに繋がると思われる二重鎖RNAの処理の仕組みはわかっていない。
本研究の目的は、細胞が二重鎖RNAストレスから回復する過程で細胞内二重鎖RNAがどのように処理されるのかを明らかにすることである。この目的を達成するため、研究計画を2つに分けて実験を進めた。
計画1では、先ず生細胞内の二重鎖RNAを定量する培養細胞系を確立し、この実験システムを用いて遺伝子ノックアウトライブラリを作成、この中から二重鎖RNAの消長に影響する遺伝子を同定する予定であった。しかし、第一段階である生細胞内の二重鎖RNA定量システムを確立することができなかった。
そこで、計画2として、既知の二重鎖RNA切断・修飾酵素遺伝子に対してCRISPR/Cas9法で遺伝子ノックアウト（KO）を行い、細胞内二重鎖RNAの消長に影響するかどうかを検討した。また、最終年度にはもう一つの培養細胞株に対しても遺伝子KOまたは短鎖干渉RNA処理による遺伝子ノックダウン（KD）を行った。合計6遺伝子についてKO/KDの効果を検討したが、いずれも細胞内二重鎖RNAの消長に影響はなかった。ヒトの二重鎖RNA切断酵素はDICER1とDROSHAの2つしか知られていないが、どちらも無関係であったことは意外であった。これらの結果を踏まえ、今後もこの問題の解明に努めたい。
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| 備考 |
所属する研究室で行っている研究の内容や研究の成果を記述してあるサイト。
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