| 研究課題/領域番号 |
20K07678
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| 研究機関 | 九州大学 |
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研究代表者 |
鬼丸 学 九州大学, 医学研究院, 共同研究員 (80529876)
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| 研究分担者 |
寅田 信博 九州大学, 大学病院, 臨床検査技師 (00398075)
千々岩 芳朗 九州大学, 医学研究院, 共同研究員 (60783701)
永吉 絹子 九州大学, 大学病院, 助教 (90761015)
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| 研究期間 (年度) |
2020-04-01 – 2023-03-31
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| キーワード | 膵癌 / 免疫逃避 / 免疫チェックポイント / PD-L1 / CTLA4 |
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| 研究実績の概要 |
近年、免疫チェックポイント阻害剤は癌免疫療法に目覚ましい飛躍をもたらしたが、非常に予後不良である膵癌においては、他の全身化学療法と同様に免疫チェックポイント阻害剤の有効性は示されていない。そこで我々は、膵癌において、免疫チェックポイントであるPD-L1経路やCTLA-4経路以外の癌免疫応答にブレーキをかけている機序があるのではないかと考え、新たな機序で免疫逃避機構を解除し、抗腫瘍効果を回復させる新規個別化癌免疫療法の開発を目指そうと考えた。
【１．膵癌を含む消化管癌手術検体のシングルセルRNA Seq解析】膵癌を含む、消化管癌の手術検体を用いて、10X GenomicsのChromiumにてシングルセルRNA Seqを行い、臓器横断的に消化管癌における免疫逃避機構に主に焦点を当てて、腫瘍内に浸潤する免疫細胞の解析を行った。また、術前化学療法投与前後の免疫チェックポイント分子やT細胞の疲弊化マーカーの経時的変化を観察するため、当院消化管内科とも協力して生検検体のサンプル解析も開始した。
【２．免疫細胞を含めた微小環境を再現する3次元培養の確立】切除膵組織より癌細胞と間質細胞、免疫細胞とともに3次元共培養した新たな Patient derived organoid (PDO) mixed immune cellsモデルの作製を進めている。
【３. 膵癌線維芽細胞に発現するPD-L1】膵癌組織中のPD-L1の発現を評価したところ、膵癌間質の線維芽細胞にもPD-L1の発現を認めた。また、手術検体のシングルセル解析においても癌関連線維芽細胞にPD-L1が発現していることを確認した。膵癌間質における線維芽細胞が発現するPD-L1が、膵癌免疫逃避機構にどのようにかかわっているのかは不明だが、豊富な間質増生を病理学的特徴とする膵癌において、新たな免疫逃避機構の一つとなる可能性がある。
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| 現在までの達成度 (区分) |
現在までの達成度 (区分)
2: おおむね順調に進展している
理由
複数例の膵癌を含む消化管癌手術検体のシングルセル解析を行った。腫瘍組織中の免疫細胞のみを抽出した後、分画細胞に分けてクラスタリング解析も進めている。また、2例の膵癌検体を用い、PDO mixed immune cellsモデルを作製した。免疫細胞維持のため、モデルの改良を進めている。さらに、膵癌線維芽細胞にも免疫チェックポイント分子が発現していることを新たに発見し、膵癌免疫逃避に関わる新たな経路となる可能性を見出すなど、本研究の進捗としてはおおむね順調に進展しているといえる。
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| 今後の研究の推進方策 |
膵癌症例については、術前化学療法の有無・種類に分けてシングルセル解析を行う。In vivoモデルとして、KPCマウスもしくは、同所移植モデルを用い、免疫チェックポイント阻害剤を投与した際の、腫瘍内の免疫細胞の疲弊化マーカーの発現を検討する。PDO mixed immune cellsモデルについては、ヒトの癌微小環境をより再現したモデルに近づけるため、モデルの改良を進める。今回新たに着目した癌関連線維芽細胞に発現するPD-L1の機能をオルガノイドモデルを用いてin vitroで検証し、膵癌免疫逃避機構に関わる新たな経路となり得るかを解明する。
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| 次年度使用額が生じた理由 |
研究計画はおおむね順調に進展しており、資金を有効に使用できたため。
次年度はシングルセル受託解析、in vivo実験用の研究器材、試薬に使用予定である。
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