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2022 年度 実績報告書

光顕・電顕相関観察法の確立に基づく脳内α-シヌクレイン凝集体伝播機構の解明

研究課題

研究課題/領域番号 20K07743
研究機関順天堂大学

研究代表者

小池 正人  順天堂大学, 大学院医学研究科, 教授 (80347210)

研究分担者 波田野 琢  順天堂大学, 大学院医学研究科, 准教授 (60338390)
研究期間 (年度) 2020-04-01 – 2023-03-31
キーワードα-シヌクレイン / 凝集体 / 伝播 / 線条体 / 黒質
研究実績の概要

α-シヌクレインフィブリルをマウス線条体に注入後の、α-シヌクレイン凝集体の形態と分布について、早期より経時的にリン酸化α-シヌクレインに対する免疫組織化学的手法を用いて検討した。その結果注入2週後ですでに線条体で点状や線維状の凝集体がみられた。注入4週後では線条体で多くの点状や線維状の凝集体が見られ、新皮質や黒質でも円形の凝集体が頻繁に観察された。注入8週後では線条体で観察される凝集体の数は減少したが、新皮質や黒質ではさらに円形の凝集体の数は増加した。注入16週後では円形の凝集体が線条体でも観察された。
最終年度においては、各種マーカータンパク質との多重染色を行い、それぞれの凝集体がどのような種類の神経細胞に局在しているのか検討した。その結果、興奮性細胞軸索マーカーであるVGLUT1と点状の凝集体の一部が共局在することがわかった。さらに、円形の凝集体が新皮質のNeuN陽性細胞、黒質のTH陽性細胞、線条体のDARPP-32陽性細胞と高頻度で共存することがわかった。さらに、免疫電子顕微鏡によりマウス新皮質のリン酸化α-シヌクレイン陽性構造物を確認した。これらの結果は、α-シヌクレインが神経細胞を逆行性に伝播していくことを支持している。私たちはさらにマイクログリアマーカー(Iba1)やアストロサイトマーカー(GFAP)との多重染色を行ったが、それらと凝集α-synとの共局在は検出されなかった。
さらに、各神経細胞種のマーカーと共存している凝集体の数について線条体と黒質で検討を行った。その結果、黒質に比べて線条体での凝集体数が有意に少ないことが分かった。黒質から線条体へ軸索投射している神経細胞はドーパミン作動性ニューロンであり、線条体に多く存在しているのはGABA作動性ニューロンであることより、α-シヌクレイン凝集体の伝播の度合いが神経細胞種より異なることが示唆された。

  • 研究成果

    (21件)

すべて 2023 2022 その他

すべて 雑誌論文 (5件) (うち査読あり 3件、 オープンアクセス 1件) 学会発表 (15件) (うち招待講演 1件) 備考 (1件)

  • [雑誌論文] GPHR‐mediated acidification of the Golgi lumen is essential for cholesterol biosynthesis in the brain2022

    • 著者名/発表者名
      Sou Yu‐shin、Yamaguchi Junji、Kameda Hiroshi、Masuda Keisuke、Maeda Yusuke、Uchiyama Yasuo、Koike Masato
    • 雑誌名

      FEBS Letters

      巻: 596 ページ: 2873~2888

    • DOI

      10.1002/1873-3468.14491

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Protocol for multi-scale light microscopy/electron microscopy neuronal imaging in mouse brain tissue2022

    • 著者名/発表者名
      Yamauchi Kenta、Furuta Takahiro、Okamoto Shinichiro、Takahashi Megumu、Koike Masato、Hioki Hiroyuki
    • 雑誌名

      STAR Protocols

      巻: 3 ページ: 101508~101508

    • DOI

      10.1016/j.xpro.2022.101508

    • 査読あり / オープンアクセス
  • [雑誌論文] A Tissue Clearing Method for Neuronal Imaging from Mesoscopic to Microscopic Scales2022

    • 著者名/発表者名
      Yamauchi Kenta、Okamoto Shinichiro、Takahashi Megumu、Koike Masato、Furuta Takahiro、Hioki Hiroyuki
    • 雑誌名

      Journal of Visualized Experiments

      巻: - ページ: -

    • DOI

      10.3791/63941

    • 査読あり
  • [雑誌論文] Fluorochromized tyramide-glucose oxidase as a multiplex fluorescent tyramide signal amplification system for histochemical analysis2022

    • 著者名/発表者名
      Yamauchi Kenta、Okamoto Shinichiro、Ishida Yoko、Konno Kohtarou、Hoshino Kisara、Furuta Takahiro、Takahashi Megumu、Koike Masato、Isa Kaoru、Watanabe Masahiko、Isa Tadashi、Hioki Hiroyuki
    • 雑誌名

      Scientific Reports

      巻: 12 ページ: -

    • DOI

      10.1038/s41598-022-19085-9

  • [雑誌論文] パーキンソン病とリソソーム2022

    • 著者名/発表者名
      11. 小池正人.
    • 雑誌名

      生体の科学

      巻: 73 ページ: 256-260

  • [学会発表] TH-GFP iPS細胞由来ドパミン神経細胞のミトコンドリアカルシウムイメージン2023

    • 著者名/発表者名
      横田睦美、吉野佑太朗、小池正人
    • 学会等名
      第128回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [学会発表] 脳神経系におけるコレステロール生合成とゴルジ体酸性pH2023

    • 著者名/発表者名
      曽友深、前田裕輔、小池正人
    • 学会等名
      第128回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [学会発表] レチノイン酸誘導神経細胞分化におけるゴルジ体酸性pHの役割2023

    • 著者名/発表者名
      増田啓祐、曽友深 、小池正人
    • 学会等名
      第128回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [学会発表] アルファシヌクレイン凝集体伝播の神経細胞種特異性における解析2023

    • 著者名/発表者名
      亀田浩司、岡本慎一郎、小池正人
    • 学会等名
      第128回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [学会発表] Preferential arborization of dendrites and axons of parvalbumin- and somatostatin-positive GABAergic neurons within subregions of the mouse claustrum2023

    • 著者名/発表者名
      高橋慧、小林朋世、水間温日、岡本慎一郎、山内健太、岡本和樹、小池正人、渡辺雅彦、伊佐正、日置寛之
    • 学会等名
      第128回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [学会発表] 背側縫線核外側部に存在するセロトニン神経細胞およびGABA作動性神経細胞の投射様式2023

    • 著者名/発表者名
      小林朋世、高橋慧、小池正人、日置寛之
    • 学会等名
      第128回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [学会発表] 運動性視床ニューロンに対する興奮性および抑制性シナプス入力様式の解析2023

    • 著者名/発表者名
      水間温日、高橋慧、小池正人、日置寛之
    • 学会等名
      第128回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [学会発表] 前脳基底部のコリン作動性およびGABA作動性ニューロン軸索の投射先解析2023

    • 著者名/発表者名
      有馬洋道、岡本和樹、高橋慧、山内健太、田中良弥、小池正人、日置寛之
    • 学会等名
      第128回日本解剖学会総会・全国学術集会
  • [学会発表] マイネルト基底核コリン作動性ニューロン軸索の単一細胞レベル解析2022

    • 著者名/発表者名
      有馬洋道、岡本和樹、高橋慧、小池正人、日置寛之
    • 学会等名
      第45回日本神経科学学会
  • [学会発表] Temporal changes of subcellular locations of alpha-synuclein aggregates in mice2022

    • 著者名/発表者名
      亀田浩司、岡本慎一郎、小池正人
    • 学会等名
      第45回日本神経科学学会
  • [学会発表] マウス前障におけるGABA作動性神経細胞の形態学的解析2022

    • 著者名/発表者名
      髙橋慧、小林朋世、岡本慎一郎、山内健太、岡本和樹、小池正人、伊佐正、日置寛之
    • 学会等名
      第45回日本神経科学学会
  • [学会発表] ナノボディをチラミドシグナル増感法により検出する三次元免疫組織化学法の開発2022

    • 著者名/発表者名
      山内健太、星野希沙良、石田葉子、小池正人、日置寛之
    • 学会等名
      第45回日本神経科学学会
  • [学会発表] 海馬において興奮は長軸に、抑制は短軸に伝わる2022

    • 著者名/発表者名
      岡本和樹、小池正人、日置寛之
    • 学会等名
      第45回日本神経科学学会
  • [学会発表] マウス前障におけるGABA作動性神経細胞の形態学的解析2022

    • 著者名/発表者名
      髙橋慧、小林朋世、水間温日、岡本慎一郎、山内健太、岡本和樹、小池正人、渡辺雅彦、伊佐正、日置寛之
    • 学会等名
      第110回日本解剖学会関東支部学術集会
  • [学会発表] PRKN変異患者iPS細胞由来GFP標識ドパミン神経細胞の超微形態学的解析2022

    • 著者名/発表者名
      小池正人
    • 学会等名
      日本顕微鏡学会第78回学術講演会
    • 招待講演
  • [備考] 順天堂大学医学部 神経生物学・形態学講座

    • URL

      https://juntendo-cellbio.jp/

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公開日: 2023-12-25  

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