自閉症モデルマーモセットによる臍帯血移植治療法の開発

2022 年度 実績報告書

• 研究課題/領域番号: 20K07752
• 研究機関: 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター
• 研究代表者: 一戸 紀孝 国立研究開発法人国立精神・神経医療研究センター, 神経研究所 微細構造研究部, 部長 (00250598)
• 研究期間 (年度): 2020-04-01 – 2023-03-31
• キーワード: 自閉症 / 間葉系幹細胞 / フローサイトメトリー / マーモセット / 治療法 / 幹細胞培養

研究実績の概要

自閉症などの発達障害においても臍帯血や骨髄に由来する造血幹細胞(Hematopoietic stem cells:HSCs)や間葉系幹細胞（Mesenchymal stem cell:MSCs）を用いた幹細胞治療が根本的な治療法として前臨床的段階で報告され始めている。本研究課題では自閉症モデルマーモセットに投与するためのマーモセットのMSCsの培養・作出をした。我々は大腿骨と上腕骨から細胞を分離し、MSCs特異的マーカーと思われる抗体を用いてFACS解析と免疫細胞学的染色を行いMSCsの存在の証明を試みた。MSCsは大腿骨と上腕骨から骨髄を除いた後、トリプシンを用いて消化分離し、15% FBS IMDM またはStemPro MSC SFM (Gibco)で、増殖因子なしで維持した。培地交換を行い、接着細胞のみ培養した。その結果、以下の所見を得た。 1)０日から22日令の新生コモンマーモセットの骨髄から分離した細胞はMSCsの特徴であるfibroblastと同様の紡錘形で、プラスチック培養機材に接着性があり、増殖因子なしで増殖が可能であった。2) 分離したマーモセット細胞はFACS解析でMSCsの特異的マーカーのCD90陽性細胞は75%陽性、CD73陽性細胞は28%であった。3) 細胞免疫学的染色法では細胞免疫用MSCs 特異的抗体CD90とCD105での陽性結果が得られた。4) マウスやマーモセット造血幹細胞のマーカーであるCD117陽性細胞、ヒトで造血幹細胞のマーカーであるCD34陽性細胞はこれらの細胞には含まれていなかった。5）マーモセットでのMSCsについてのこれまでの報告はかなり少ないが、その中でコモンマーモセットでは大腿骨や上腕骨から細胞分離が可能であり、これら細胞からMSCsの特徴を持つ細胞が培養可能であることがわかった。

研究成果

• [雑誌論文] Prenatal valproic acid-induced autism marmoset model exhibits higher salivary cortisol levels (2022)
  • 著者名/発表者名: Nakamura, M., Nakagami, A., Nakagaki, K., Yasue, M., Kawai, N., & Ichinohe, N
  • 雑誌名: Front Behav Neurosci 巻: 16 ページ: 943759
  • DOI: 10.3389/fnbeh.2022.943759.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Reduced childhood social attention in autism model marmosets predicts impaired social skills and inflexible behavior in adulthood (2022)
  • 著者名/発表者名: Nakagami, A., Yasue, M., Nakagaki, K., Nakamura, M., Kawai, N., & Ichinohe, N
  • 雑誌名: Front Psychiatry 巻: 13 ページ: 885433
  • DOI: 10.3389/fpsyt.2022.885433.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Association between vascular endothelial growth factor-mediated blood-brain barrier dysfunction and stress-induced depression. (2022)
  • 著者名/発表者名: Matsuno, H., Tsuchimine, S., O'Hashi, K., Sakai, K., Hattori, K., Hidese, S., Nakajima, S., Chiba, S., Yoshimura, A., Fukuzato, N., Kando, M., Tatsumi, M., Ogawa, S., Ichinohe, N., Kunugi, H., & Sohya, K.
  • 雑誌名: Mol Psychiatry 巻: 27(9) ページ: 3822-3832
  • DOI: 10.1038/s41380-022-01618-3.
  • 査読あり
• [雑誌論文] Brain Dp140 alters glutamatergic transmission and social behaviour in the mdx52 mouse model of Duchenne muscular dystrophy (2022)
  • 著者名/発表者名: Hashimoto, Y., Kuniishi, H., Sakai, K., Fukushima, Y., Du, X., Yamashiro, K., Hori, K., Imamura, M., Hoshino, M., Yamada, M., Araki, T., Sakagami, H., Takeda, S., Itaka, K., Ichinohe, N., Muntoni, F., Sekiguchi, M., & Aoki, Y
  • 雑誌名: Prog Neurobiol 巻: 216 ページ: 102288
  • DOI: 10.1016/j.pneurobio.2022.102288.
  • 査読あり